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自Leptin基因与leptin受体基因被发现以来,其广泛的生物学作用引起人们巨大的研究兴趣,它们的结构、功能、变异、表达、产物特性及影响因素已经成为肥胖分子机制研究的热点。在动物生产上,对leptin基因与leptin受体基因基因多态性、产物特性等方面的研究,将有助于指导实际生产。
本研究通过PCR-RFLP方法研究了leptin基因T3469C、G3952C位点与leptin受体基因G673A位点在长白猪、大白猪、杜洛克猪、蓝塘猪中的基因多态性分布情况;并对leptin基因T3469C、G3952C位点的各种基因型与生产性状进行了关联分析。同时,以广东省地方品种蓝塘猪代表脂肪型猪种,以引入品种长白猪代表瘦肉型猪种,利用荧光定量PCR、放射免疫分析法等技术,分五个阶段(1日龄、27日龄、90日龄、150日龄、180日龄)屠宰蓝塘猪与长白猪各六头,对皮下脂肪与下丘脑总mRNA中leptin基因与leptin受体基因mRNA的相对表达量及血清中的leptin水平进行比较检测,此外还测定了后四个阶段蓝塘猪与长白猪的背膘厚度、眼肌肌内脂肪含量与眼肌水分含量,并得出了以下结果:
1、Leptin基因T3469C位点在国外猪种中T等位基因基因频率高于C等位基因,长白猪的基因型分布偏离哈迪-温伯格平衡定律。而蓝塘猪中,C等位基因有较高的基因频率。在G3952C位点上,大白猪、杜洛克猪中全部为GG基因型。长白猪中只有GG、GC基因型。蓝塘猪中以C等位基因基因频率较高,但基因型分布偏离哈迪-温伯格平衡定律。Leptin受体基因的G673A位点在在国外猪种中均无发现基因多态性;蓝塘猪中也是G等位基因有较高的基因频率,其基因型分布频率偏离哈迪-温伯格平衡定律。
2、Leptin基因T3469C位点的基因型与长白、大白、杜洛克的背膘厚度显著相关。G3952C位点的基因型与长白猪0~100kg日增重、30~100kg日增重显著相关。
3、蓝塘猪在生长发育的各个阶段,背膘厚度均显著大于长白猪(P<0.05);肌内脂肪含量除第2阶段外,蓝塘猪均显著高于长白猪。
4、Leptin基因mRNA在皮下脂肪中的相对表达量除第1阶段外,蓝塘猪的相对表达量均高于长白猪,到第5阶段,两者的差异达到显著水平(P<0.05)。
5、Leptin受体基因的相对表达量在第1、第2和第5阶段蓝塘猪高于长白猪,但在第3与第4阶段,长白猪的相对表达量高于蓝塘猪但差异不显著。
6、蓝塘猪与长白猪血清中的leptin水平都随着日龄的增长而逐渐增高;蓝塘猪在第2、第3、第4阶段显著高于长白猪。
7、蓝塘血清leptin水平与猪背膘厚度、leptin基因mRNA在皮下脂肪的相对表达量、眼肌肌内脂肪含量呈显著正相关,与leptin受体在下丘脑的相对表达量呈显著负相关。背膘厚度还与leptin基因在皮下脂肪的相对表达量和肌内脂肪含量呈显著的正相关。
8、长白猪背膘厚度、眼肌肌内脂肪含量的变化与leptin受体基因mRNA在下丘脑的相对表达量变化呈显著的负相关,血清中的leptin水平与leptin基因在皮下脂肪的相对表达量呈显著的正相关。