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本论文分为两部分,第一部分针对Fcα/μR在人肾小球系膜细胞上的功能和在IgM肾病(IgMN)发病中可能的病理意义进行了探索。IgMN是以肾小球系膜区IgM沉积为主的原发性系膜增生性肾小球肾炎,但是IgM及IgM-IC在系膜区沉积的机制一直不明确。Fcα/μR是能够和IgA或IgM以中等亲和力或高亲和力结合的Fc受体,并在原代培养的肾小球系膜细胞中发现有表达。为了研究Fcα/μR是否可能促进IgM及IgM-IC在肾小球系膜细胞上沉积,本实验建立了表达人Fcα/μR的HMC细胞系,并对其结合IgM,IgA及IgM-IC的情况进行了鉴定。在建立细胞稳定株过程中,尝试使用逆转录病毒,慢病毒和脂质体转染方法后,最后选定利用脂质体将Fcα/μR cDNA转染入人肾小球系膜细胞(HMC),药物筛选后进行克隆化培养。利用Western blot检测到Fcα/μR在HMC中表达,激光共聚焦显微术检测到其在细胞膜的表达。用流式细胞术与激光共聚焦显微术检测到IgM,IgA以及IgM-IC能通过Fcα/μR与HMC-Fcα/μR结合。考虑到IgMN中IgM沉积常伴有补体C3片段沉积,而IgM-IC是很强的补体激活剂,我们又对HMC-Fcα/μR结合IgM-IC以后介导补体对细胞的杀伤情况进行了研究。用台盼蓝染色检测补体介导的细胞杀伤作用。在补体作用下,HMC-Fcα/μR死亡率显著高于对照组野生型细胞,空载质粒转染细胞及无IgM-IC结合的HMC-Fcα/μR (P<0.001)。以上结果表明,Fcα/μR能结合IgM-IC并介导补体杀伤人肾小球系膜细胞。第二部分主要探讨了IgAN病人外周血B细胞永生化的方法。为了对IgAN中异常糖基化IgAl的来源进行研究,需要有充分稳定的分泌IgAl细胞样本,但是临床样本十分有限,所以有必要采用EB病毒转化病人外周血B细胞的方法,来获得永生化的细胞系。通过实验成功建立起了IgAN病人,其他肾病病人和正常人的永生化B细胞系,并建立起可以用双抗体夹心ELISA检测IgA的方法,利用这种方法检测到永生化细胞培养上清中有IgA的表达。