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目的：癫痫(epilepsy)源于希腊之epilambanein，意为发作，是一组由大脑神经元群过度放电所致的神经系统慢性功能性疾病。颞叶癫痫是一种常见的难治性部分发作性癫痫，其典型临床表现由先兆症状和复杂部分性发作症状两部分组成。颞叶癫痫持续发作会增加海马结构永久性损伤的危险性。海人酸模型是一种理想的颞叶癫痫模型。雌激素是一种神经甾体激素，由于其分子量小且有亲脂性的特点，易于透过血脑屏障到达神经组织。雌激素对癫痫的作用较为复杂。1985年Mattson and Cramer及1997年Herzog等均报道在一些女性患者月经期内有癫痫发作频率的改变，称之为经期性癫痫。临床观察发现雌激素可能为致惊厥因素。女性颞叶癫痫患者常有生殖性内分泌紊乱，如无排卵周期或月经过少。对于这些女性患者，恢复正常的排卵周期是一种有效地治疗方法。2000年Peebles等报道雌激素单一替代疗法可以降低绝经后期癫痫发生率。动物实验表明，雌激素剂量可能影响到其对癫痫易感性的作用。2000年Veliskova等报道低于10ug的雌二醇预处理可以延迟海人酸致痫去势大鼠阵挛发作的时间，与此同时，Reibel报道20ug雌二醇对癫痫发作的阂值没有影响，40ug则有致惊厥作用。实验数据表明，雌激素可能对去势雌性大鼠癫痫持续状态后神经损伤有保护作用。2000年Veliskova等报道生理剂量雌二醇可以降低海人酸致痫大鼠的死亡率，对癫痫后海马CA3区神经损伤有保护作用。由于以往研究因动物模型、实验技术及科研方法的不同，导致研究结论的可比性有限。本实验在条件一致的情况下，采用不同剂量的雌激素处理，通过观察海人酸致痫大鼠发作程度、潜伏期及死亡率，并利用HE染色及免疫组化染色技术，观察雌激素治疗对癫痫发作的影响及癫痫发作造成海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响，了解雌激素对于癫痫发作的影响及其剂量依赖性。
方法：将70只健康雌性SD大鼠在无菌条件下行双侧卵巢切除术，术后14天随机分为5组，分别为正常对照组(第1组)6只，癫痫对照组(第2组)、雌激素10ug/kg治疗组(第3组)、雌激素100ug/kg治疗组(第4组)、雌激素1mg/kg治疗组(第5组)各16只。正常对照组及癫痫对照组大鼠间隔24h 5次皮下注射0.1ml芝麻油，三组治疗组同时分别给予皮下注射17 β-雌二醇苯甲酸盐(beta-estradiolbenzoate，EB)10ug/kg、100ug/kg、1mg/kg，癫痫对照组及治疗组大鼠在第5次给药后19h利用立体定位仪向大鼠右侧海马CA3区注射海人酸4ug/kg(溶于生理盐水浓度为2ug/ul)致痫，正常对照组以生理盐水代替。发作程度按Racine分级标准评分，观察并记录大鼠行为变化、死亡率及癫痫持续状态开始的时间，计算潜伏期。癫痫持续状态发作后2小时，三组治疗组间隔24h 2次分别皮下注射EB10ug/kg、100ug/kg、1mg/kg，对照组以芝麻油代替。各组大鼠最后一次皮下注射EB或芝麻油后24小时用冷盐水灌注，4％多聚甲醛磷酸盐缓冲液固定及后固定，石蜡包埋。将石蜡切片进行HE染色观察细胞凋亡，免疫组织化学染色观察Bcl-2、Bax的表达。结果采用SPSS11.5统计软件处理。所有计量资料采用均数±标准差表示。统计学方法采用卡方检验、Kruskal-WallisH检验、单因素方差分析和Dunnett-t检验。
结果：癫癎对照组与三组不同剂量雌激素治疗组大鼠均达到癫癎持续状态，抽搐发作程度均在Ⅲ级以上，比较无统计学意义。癫癎对照组及三组雌激素治疗组癫癎持续状态的潜伏期分别为79.63±5.06min，77.06±4.82min，77.56±7.15min，69.63±6.18min。雌激素10ug/kg治疗组、雌激素100ug/kg治疗组与癫癎对照组比较无差异(P>0.05)，雌激素1mg/kg治疗组与癫癎对照组比较有差异(P<0.05)，可以缩短癫癎持续状态发作的潜伏期。癫癎对照组及三组雌激素治疗组的死亡率分别为37.5％、6.25％、6.250％、6.25％，三组不同剂量雌激素组与癫癎对照组比较均有差异(P<0.05)，三组不同剂量雌激素组之间比较无差异(P>0.05)。
HE染色结果：凋亡指数(apoptosis index，AI)正常对照组凋亡指数为7％，半定量+，EB 10ug/kg、100ug/kg治疗组凋亡指数分别为12％，15％，半定量++。癫癎对照组与EB 1mg/kg治疗组凋亡指数分别为25％，22％，半定量为+++。癫癎对照组与正常对照组比较凋亡细胞数目明显增多，EB10ug/kg、100ug/kg治疗组与癫癎对照组相比凋亡细胞数目减少，比较有统计学意义。EB 1mg/kg治疗组与癫癎对照组比较无统计学意义。
免疫组织化学染色结果：各组大鼠(按分组顺序)Bcl-2的表达分别为：2.80±0.84，2.20±1.32，3.74±1.81，3.14±1.83，3.27±1.16，雌激素治疗组与癫癎对照组比较均无统计学意义。Bax的表达分别为：23.80±6.98，53.20±8.30，37.60±4.58，36.14±6.01，52.53±5.94，癫癎对照组与正常对照组比较Bax的表达明显增加，比较有统计学意义，雌激素10ug/kg、100ug/kg治疗组Bax表达减少，与癫癎对照组比较有统计学意义，雌激素1 mg/kg治疗组与癫癎对照组比较无统计学意义。
结论：雌激素对于海人酸致痫大鼠癫癎易感性受剂量影响，较大剂量雌激素可缩短海人酸致痫大鼠癫癎持续状态潜伏期，增加其易感性。雌激素虽不能降低海人酸致癎大鼠癫癎发作的严重程度，但可以降低癫癎持续状态后大鼠的死亡率，且不依赖于剂量的影响。癫癎持续发作后48h大鼠海马CA3区神经元数目减少，凋亡细胞数目增多，适量雌激素治疗对癫癎持续状态导致海马神经损伤有保护作用，抑制凋亡促进基因Bax的表达可能参预了其神经保护作用。大剂量雌激素治疗对于海人酸致癎大鼠癫癎持续状态后神经元损伤无明显保护作用。