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新城疫和禽流感仍是禽业生产中的两种主要疫病,病死率高,给养禽业带来巨大经济损失。目前,这两种疫病主要通过疫苗防治,但由于新型病毒不断出现,而且临床免疫实践中常出现免疫效果不好、免疫耐受和免疫失败等问题,所以深入研究免疫反应的分子作用机制和开发实用可行免疫效果早期诊断方法,可能对解决这些问题具有理论和实践意义。本研究以新城疫疫苗(Ⅳ系Lasota株)和禽流感疫苗(H9亚型,SS株)免疫雏鸡,分析疫苗免疫后的天然免疫阶段和特异性免疫阶段中免疫相关基因akirin2、miR-155和SMS1的表达特性,主要研究方法和实验结果如下:为深入研究疫苗免疫雏鸡后免疫反应相关基因的表达特性与调控关系,本实验以11日龄海兰褐雏鸡作为研究对象,采用新城疫疫苗和禽流感疫苗分别免疫雏鸡,于疫苗免疫后12h、24h、72h、120h、7d、21d、35d和42d分别收集肝脏、胸腺、法氏囊、脾和血液等组织,利用荧光定量PCR定量分析免疫相关基因akirin2的转录活性变化。结果表明:新城疫疫苗组和禽流感疫苗组抗体变化均在14d时达到峰值。在新城疫疫苗组中,akirin2在72h时在肝脏、胸腺和法氏囊中表达量显著下调(P<0.01),120h时在肝脏、胸腺、法氏囊、脾中的表达量均显著上调(P<0.01);akirin2基因在全血中的120h中表达量显著上调(P<0.01)。在禽流感疫苗接种组中,akirin2基因在120h时的各免疫组织中均呈现上调变化,且在胸腺、法氏囊和脾脏中表达显著上调(P<0.01);7d时在肝脏和胸腺中也呈上调(P<0.01);有趣的是,在全血中akirin2基因也在120h表达显著上调(P<0.01)。新城疫疫苗和禽流感疫苗分别免疫雏鸡,并在免疫后的12h、24h、72h、120h、7d、21d、35d和42d收集血清,荧光定量PCR定量分析血清中miR-155表达活性。结果表明:在新城疫疫苗免疫后120h时的特异性免疫应答早期阶段,血清miR-155的表达活性显著上调至峰值(P<0.01);禽流感疫苗免疫组血清mi R-155表达活性在免疫后120h时也显著上调至峰值(P<0.01)。为深入研究鸡SMS1基因的功能,本实验首先克隆了AA~+肉鸡和三黄鸡两个品系鸡的SMS1全长编码序列,并对四个品系鸡(红原鸡、海兰褐、AA~+和三黄鸡)的SMS1基因进行生物信息学分析,其次分析该基因的组织表达特性,最后验证该基因是否与免疫反应相关。结果表明:SMS1基因的编码区在四个品系鸡间存在5个SNP位点。14日龄海兰褐雏鸡和三黄鸡SMS1基因在血中的表达量均最高,而在其它组织中均呈现低表达量。在新城疫疫苗疫组中,SMS1基因在120h和21d的雏鸡肝脏中表达量均呈现显著上调(P<0.01),而在血中表现为120h表达量微下调,21d时表达量微上调;在禽流感疫苗免疫组中,SMS1基因在雏鸡肝脏的120h时表达量也显著上调(P<0.01),21d时表达量则为显著下调(P<0.01),而血中SMS1基因在120h时表达量略有降低,21d时则表现为显著上调(P<0.05)。本研究表明akirin2、mi R-155和SMS1基因是影响免疫反应中的重要调控基因。研究这些基因在免疫反应中的表达与调控关系,对于深入理解akirin2基因在疫苗免疫反应中的分子作用机制,和mi R-155在开发新型疫苗免疫效果早期诊断方法中的可能应用,以及深入了解SMS1基因的功能特性提供重要的理论参考。