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本文分为两个部分进行探讨： 第一部分:现代生活的不断繁荣发展，使得人们的生活节奏越来越快，人们正在接受越来越多、越来越残酷的社会和心理因素的挑战。在现代社会生活中，女性拥有多重角色，不仅要做好传统的家庭妇女的工作，越来越多的女性也进入职场，因此，女性受到的各方面的压力要更大一些。应激引起的心理性疾病，如抑郁、焦虑等都可以造成女性不孕。目前，关于束缚应激对雌性生殖功能影响的研究大都集中在妊娠期间。然而，妊娠前雌性动物，暴露在慢性应激条件下，更能模拟日常生活中女性所受的应激状态。因此，我们在本实验中采用了这一实验模型，开展了慢性束缚应激对后代焦虑行为的影响的研究。本实验以8周龄昆明白雌性或雄性小鼠作为研究对象，以慢性束缚应激(8h/d，30 or60d)为心理应激模型，研究了慢性束缚应激对母鼠生殖性能（妊娠期、产仔数、性别比例）和后代焦虑行为（分别从行为学、分子学以及激素水平）的影响。 结果表明: 1.慢性束缚应激母鼠一个月，对母鼠的妊娠率、妊娠期、产仔数、性别比例等生殖性能没有影响。所产的F1代，在高架十字迷宫中的开放臂停留时间稍高于对照组，但差异不显著，进入开放臂的次数也稍高于对照组差异不显著。这说明慢性束缚应激母鼠一个月的F1代的焦虑行为与对照组相比开始有下降的趋势。在旷场实验的中央区域停留时间稍高于对照组，进入中央区的次数也稍高于对照组，并且CD/TD也稍高于对照组，但都差异不显著。 2.慢性束缚应激母鼠一个月，所产的F1代在测完高架十字迷宫后，测得的皮质醇浓度稍低于对照组测完高架后的血清中的皮质醇浓度，但差异不显著。测完行为的一周后，海马中与焦虑相关基因GR和BDNF的表达量表达量相比于对照组，都没有大的变化。 3.慢性束缚应激母鼠两个月，所产的F1代，在高架十字迷宫中的开放臂停留时间显著高于对照组，进入开放臂的次数也显著高于对照组。在旷场实验的中央区域停留时间显著高于对照组，进入中央区的次数也是显著高于对照组，并且CD/TD也显著高于对照组。 4.慢性束缚应激母鼠两个月，所产的F1代在测完高架十字迷宫后，测得的皮质醇浓度显著低于对照组测完高架后的血清中的皮质醇浓度。测完行为的一周后，海马中与焦虑相关基因GR和BDNF的表达量表达量相比于对照组，都有显著升高。 5.双应激两个月的F1代在高架十字迷宫中，在开放臂的停留时间显著高于对照组，进入开放臂的次数也显著高于对照组，在旷场实验中，在中央区域的停留时间显著高于对照组，进入中央区域的次数也显著高于对照组，并且CD/TD也显著高于对照组。这也说明双应激能显著降低F1代的焦虑行为，并有增强降低焦虑行为的效应的趋势。 6.双应激两个月，所产的F1代在测完高架十字迷宫后，测得的皮质醇浓度显著低于对照组测完高架后的血清中的皮质醇浓度。在测完行为的一周后，海马中与焦虑相关基因GR和BDNF的表达量相比于对照组都有显著升高。 7.为了检测慢性束缚应激对F2焦虑行为的影响，在我们的实验中分别做了四种杂交组合，分别是对照母×对照公，焦虑下降母×焦虑下降公，焦虑下降母×对照公，对照母×焦虑下降公。所产下的F2代，在高架十字迷宫的表现，应激F2代都有焦虑下降的表现或趋势。对焦虑下降母×焦虑下降公这一组合的F2代，测完高架后血清中皮质醇的含量显著低于对照组。海马体内GR和BDNF的表达量都显著高于对照组。 8.在两个月的慢性束缚应激过程中，选取了8个时间点，当天应激结束后，用高架十字迷宫检测焦虑行为，我们发现小鼠一直处于应激状态。另外，进入开放臂的次数这项数据，从30天后，应激组和对照组就差异不显著了。另外在我们选取的8个时间点，当天应激结束后，检测血清中皮质醇的含量。随着应激时间的增长，应激小鼠血液中的皮质醇含量是逐渐减少的。第一天含量最高，说明第一天应激反应最强烈，之后慢慢适应应激环境。从30天后到60天，皮质醇水平趋于稳定，应激组水平始终比对照组高。 综上所述，慢性束缚应激母鼠一个月不能显著降低F1代的焦虑行为，但是有下降的趋势。慢性束缚应激母鼠两个月，能显著降低F1代的焦虑行为。双应激能增强应激对后代焦虑行为的影响。慢性束缚应激F0代的过程中，随着应激时间的增长，虽然小鼠在一定程度适应了应激环境，但始终处在一个应激状态。慢性束缚应激母鼠两个月的F1代之间相互杂交，产下F2代。F2代也在不程度上出现了焦虑水平下降。焦虑水平下降的F1代公鼠更容易影响F2代雌鼠的焦虑行为，焦虑水平下降的F1代母鼠更容易影响F2代公鼠的焦虑行为。 第二部分:排卵前一系列内源性促性腺激素的刺激使得卵母细胞周围紧实的卵丘细胞发生扩展作用，我们称之为卵丘扩展或粘液化。卵丘扩展对于卵母细胞成熟、排卵、受精以及胚胎发育都有重要作用。研究证明在卵泡液中存在一种抑制卵丘扩展的因子，称之为CEIF（cumulus expansion inhibiting factors）。在我们的实验中我们研究了山羊卵泡液中CEIF的存在情况和初步定性以及山羊卵泡膜细胞对GVBD的作用。我们用种间测试系统，应用小鼠的COCs检测山羊大、中卵泡液以及山羊中卵泡中各种卵泡细胞分泌CEIF的情况，并CEIF进行了初步的定性分析。我们还检测了山羊卵泡膜细胞和山羊卵泡液对小鼠GVBD的影响。 结果如下： 1.100％的山羊中卵泡液能把小鼠卵丘扩展抑制在10％左右，因此中卵泡液中存在CEIF，而且70％的卵泡液都不能有效抑制小鼠COCs的卵丘扩展，因此说明中卵泡液中的CEIF必须在高浓度下才能发挥作用。而对于大卵泡液，100％的浓度也不能有效抑制小鼠COCs的扩展，因此山羊大卵泡液中不存在CEIF。 2.膜细胞条件化培养液能显著抑制小鼠COCs的扩展，但是壁颗粒细胞以及卵丘细胞的条件化培养液均不能抑制小鼠的卵丘扩展，说明小鼠卵泡膜细胞能分泌CEIF，而壁颗粒细胞和卵丘细胞都不能分泌CEIF。 3.山羊中卵泡液中亚油酸的含量是显著高于大卵泡液中的含量的。但是膜细胞和卵丘细胞的条件化培养液中都不含有亚油酸。这说明中卵泡液中CFIF和膜细胞分泌的CEIF可能不是同一种物质。这也说明CEIF可能是不止同一种物质。在基础培养液中添加的亚油酸浓度与大卵泡液中测出的亚油酸浓度一致时，我们发现对小鼠和山羊的卵丘扩展都不起抑制作用，而当浓度提升至中卵泡液中亚油酸浓度时，会显著抑制小鼠以及山羊的卵丘扩展。 4.大卵泡液中的总的糖胺聚糖的含量是比中卵泡液中低的，并且卵丘细胞和膜细胞条件化培养液中总的糖胺聚糖的含量是很低的，而且两中条件化培养液之间差异不显著。对于肝素，中卵泡液中含量与大卵泡液相比差异不显著，两种条件化培养液中含量差异也不显著。对于硫酸软骨素B，结果是类似的，两种卵泡液之间以及两种条件化培养液之间差异不显著。 5.对于COCs，膜细胞条件化时不加激素，对于GVBD是完全不起抑制作用的，但是对于DOs，条件化培养基对GVBD是起促进作用的。因此，如果山羊膜细胞产生这种抑制GVBD的因子，一定是激素依赖性的，并且通过卵丘颗粒细胞起作用。山羊的大卵泡液不能显著抑制卵母细胞的GVBD，但是中卵泡却能显著抑制小鼠的GVBD。 综上所述，山羊中卵泡液中含有CEIF，大卵泡液中不含有CEIF。山羊中卵泡液的膜细胞能分泌CEIF，卵丘细胞以及壁颗粒细胞不能分泌CEIF。亚油酸是山羊卵泡液中的一种CEIF，但不是唯一的。山羊卵泡液中的CEIF不是糖胺聚糖。山羊膜细胞如果能产生抑制GVBD的因子，一定是激素依赖性的，并且通过卵丘颗粒细胞起作用。