应用Envision免疫组化法对曲霉菌性鼻窦炎的诊断研究

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[背景]曲霉是霉菌性鼻窦炎常见的条件致病菌,近年来随着长期应用激素、滥用抗生素、全身或局部免疫力下降、患有严重的消耗性疾病以及免疫缺陷患者的逐渐增多,它引起的感染呈逐年上升趋势。曲霉菌性鼻窦炎缺乏特异的临床表现,其常用的传统的诊断方法包括影像学、组织病理和真菌培养。真菌感染的影像学表现与细菌性鼻窦炎及肿瘤等其他疾病常难以鉴别,真菌涂片阳性率较高,但无法准确判断真菌属性,真菌培养有阳性率低、易漏诊、耗时间长及易受污染菌影响等缺点,组织病理是传统的诊断方法,HE染色和PAS染色仅通过形态学鉴定真菌,存在一定的局限性。早期诊断并将致病菌鉴定至属或种的水平对及时用药及预后至关重要,需要寻找快速、敏感、特异的诊断方法。 [目的]通过对40例临床怀疑经涂片确诊为霉菌性鼻窦炎的患者,应用Envision免疫组织化学二步法进行检测并与HE染色和PAS染色法及真菌培养对比,观察此方法的特异性和敏感性。 [材料与方法]标本40例取自我院耳鼻喉科通过内窥镜术所得鼻窦内容物,经真菌涂片怀疑为曲霉感染者。然后将其一部分做真菌培养;剩余部分给予福尔马林固定,石蜡包埋切片,1)常规HE染色,2)PAS染色,3)Envision免疫组织化学二步法—选用鼠抗曲霉单克隆抗体。同时选用4例其它真菌(2例来自镰刀菌感染动物的皮肤标本、1例来自我院的甄氏外瓶霉感染的咽部标本、一例来自我院的由少根根霉感染引起的鼻脑接合病标本),感染标本做对照标本。 [结果]40例中真菌培养19例为曲霉、1例为无孢子菌,1例为尖端单孢子菌,1例为链格胞菌,1例为念珠菌,其余17例培养阴性,培养总耗时10天。常规HE和PAS染色均可见菌丝,10可见孢子,但不能确定种属。免疫组织化学染色耗时5-24小时,示40例阳性,均为曲霉感染,染色背景清晰,对比度强。4例对照标本免疫组织化学染色阴性,为非曲霉菌感染。 [结论]Envision免疫组织化学二步法可以快速敏感、特异地检测出组织中的曲霉感染,具有高敏感、低背景、快速简洁的特点,此项技术适用于霉菌性鼻窦炎的检测。
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