论文部分内容阅读
通过对目前常用的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFT B1)检测方法的研究,开发出一种高效,低耗的液相色谱(配有柱后衍生系统)检测方法。经过本研究试验建立了粮食和食用油的样品处理方法、仪器检测条件以及样品测定精密度评价结果如下:谷物样品前处理步骤:称取25.0g粉碎后谷物样品于均质杯中,加入100mL甲醇/水(7/3,V/V)溶液,高速均质5min,静置分层后,吸取5 mL上层清液,4000r/min高速离心后吸清液过0.22μm针式过滤头进样。食用油样品前处理步骤:称取5.0g食用油样品于50 mL具塞量筒中,加入20 mL石油醚,振摇使油样溶解,加入10 mL甲醇-水(7+3)溶液,涡旋混合提取5min,静置分层后,吸取5 mL下层提取液,放入冰箱中,在-25℃下迅速冷冻10min,将提取液趁凉用0.22μm针式过滤头过滤后进样分析。液相色谱检测条件:采用荧光检测器进行检测分析,激发波长:360nm;发射波长:440nm;流动相:甲醇-乙腈-水(22+22+56);流速:1.0mL/min。柱后衍生系统检测条件:采用C18(4.6×250mm×5μm)色谱柱进行分离,柱温:42℃;反应器温度:90℃;衍生剂:I2溶液(100mg/L);流速:0.3 mL/min。本论文研究的液相检测方法对黄曲霉毒素B1标准样品峰面积响应良好,能对粮食和食用油样品中的黄曲霉毒素B1加入标样进行有效分离。建立的标准曲线线性回归方程的相关系数为0.9998。本方法的最低检测限为0.4μg/kg,对市售食用油的不同浓度加标回收率为90.4%~99.4%,相对标准偏差为4.56%~5.36%;对玉米、大米等粮食的不同浓度加标回收率为91.2%~100.6%,相对标准偏差为1.40%~2.35%。本方法对粮食和食用油中黄曲霉毒素B1检测结果的重复性和准确性优于现有的ELISA方法、免疫亲和层析净化高效液相法和荧光光度等方法。该检测方法与其他仪器检测方法相比不用任何净化小柱,缩短了检测时间,降低了检测成本,前处理更加简便快捷,灵敏度、准确性高,检测限低,能够满足粮食和食用油中黄曲霉毒素B1的检测要求。