了哥王细胞毒性和抗病毒活性成分研究

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采用生物活性测定和化学分析、分离相结合的方法,研究了了哥王(Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey.)细胞毒性和抗病毒活性成分。采用细胞病变抑制法和四甲基偶氮唑盐比色法测定了了哥王乙醇提取物及其各溶剂萃取部位和不同提取时间的各水提物对非洲绿猴肾细胞(Vero)和人宫颈癌细胞(HeLa)的细胞毒性。实验结果表明,(1)了哥王水提物对Vero细胞和HeLa细胞的毒性不高,且煎煮时间(1~10 h)对水提物的细胞毒性影响不大,不同提取时间所得水提物的CC50在125μg/mL~250μg╱mL之间;(2)了哥王的毒性成分主要是其低极性成分,了哥王石油醚萃取部位对Vero细胞和HeLa细胞的CC50分别为3.1μg/mL和10μg╱mL,乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱初步分离得到的两个低极性组分WIE-1和WIE-2对Vero细胞的CC50分别为70μg/mL和18.75μg/mL,对HeLa细胞的CC50分别为83.3μg/mL和66.7μg/mL。对石油醚萃取部位、WIE-1和WIE-2组分的化学成分进行GC-MS分析比较,发现石油醚萃取部位、WIE-1和WIE-2组分的主要成分为:双环不饱和烷烃、脂肪酸甲酯类物质和甾类物质,其中以脂肪酸甲酯类物质最多。在石油醚萃取部位中脂肪酸甲酯约占总量的68.42%。脂肪酸甲酯类物质中含量较高的是棕榈酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和硬脂酸甲酯,它们在石油醚萃取部位中的含量分别为10.95%、8.59%、3.71%和5.03%。通过比较分析,我们初步推测长链的脂肪酸甲酯类物质为了哥王中的细胞毒性成分。此外,我们还对了哥王乙醇提取物及其各溶剂萃取部位和不同提取时间的各水提物的化学成分进行了HPLC分析比较。对了哥王乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行了分离,采用光谱分析和文献对照相结合的方法,对分离所得单体化合物的结构进行确定,共鉴定出7个单体化合物。它们分别是:西瑞香素(1),邻苯二甲酸二丁酯(2),β-谷甾醇(3),对羟基苯甲酸甲酯(4),2,4,6-三羟基苯甲酸甲酯(5),芫花素(6)和sikokianin(7)。其中邻苯二甲酸二丁酯(2),对羟基苯甲酸甲酯(4)和2,4,6-三羟基苯甲酸甲酯(5)为首次从瑞香科植物中分离得到。体外抗病毒活性的测定表明,西瑞香素(1)具有明显的抗RSV病毒活性,IC50为7.81μg/mL,SI为32.01。通过以上的研究,我们确定了哥王细胞毒性成分在低极性部位,并推测了哥王中的细胞毒性成分为长链的脂肪酸及其酯,并且我们从了哥王乙酸乙酯萃取部位分离得到具有抗RSV病毒活性的单体化合物西瑞香素。
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