论文部分内容阅读
目的:本研究是在建立去卵巢(Ovariectomy, OVX)SD大鼠骨质疏松性骨折模型的基础上,用阿仑膦酸钠(Alendronate, ALN)进行干预,通过组织形态学、免疫组织化学等实验方法,探讨阿仑膦酸钠对去卵巢大鼠骨折愈合过程的影响及其作用机制。方法:1.骨质疏松性骨折动物模型的建立三月龄成年雌性SD大鼠30只,260-300克,随机分为3组,正常对照组(Sham组)10只,卵巢切除+骨折+生理盐水对照组(OVX组) 10只,卵巢切除+骨折+阿仑膦酸钠给药组(ALN组) 10只。ALN组与OVX组完整摘除双侧卵巢。卵巢切除术4周后,对Sham组与OVX组大鼠进行股骨骨密度检测,以确定骨质疏松模型的建立,随后对ALN组与OVX组大鼠右侧股骨中段进行开放性骨折手术,并对骨折断端复位内固定。2.给药方法:骨折固定术后,ALN组按30ug /(kg·week)皮下注射阿仑膦酸钠,OVX组给予同等量的生理盐水,并于3周末处死各组大鼠。3.观察指标及测定方法3.1骨密度检测:应用NORLAND EXCELL双能x线吸收仪检测去卵巢术后4周大鼠股骨骨密度及骨折术后3周末大鼠股骨骨密度。3.2影像学检测:应用计算机X线摄像仪(DR)对骨折术后3周大鼠股骨进行DR摄片。3.3骨痂组织学染色:对骨折术后3周的骨痂组织进行HE染色及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色。3.4免疫组织化学检测:采用SP免疫组织化学染色法对骨痂进行染色,并用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图像分析系统做图像分析,检测术后3周骨折端BMP-2、VEGF的表达。结果:1.骨密度检测结果:OVX组大鼠股骨骨密度显著低于正常组(P<0.01);ALN组大鼠右侧股骨tBMD和dBMD显著高于OVX组。(P<0.01) 2.影像学结果:骨折术后3周,ALN组与OVX组骨折断端处骨痂形成,骨折线清晰可见, ALN组骨痂量较多。3.组织形态学结果:骨折术后3周,ALN组膜内成骨与OVX组相似,在骨折断端处肉芽组织机化,在纤维性骨痂中出现软骨岛,软骨岛周边出现新生的骨小梁,并且ALN组的透明软骨细胞明显多于OVX组。4. TRAP染色结果:ALN组破骨细胞体积明显大于OVX组,细胞核数目明显增多,破骨细胞数明显少于OVX组(P<0.05)。5.免疫组织化学结果显示: ALN组BMP-2表达的平均阳性细胞积分光密度值(IOD)低于OVX组,VEGF的IOD值高于OVX组,但两组间差别无统计学意义。(P>0.05)。结论:阿仑膦酸钠(30ug /kg·week)对去卵巢大鼠股骨骨折愈合无显著作用,但却可以使骨折断端骨痂体积增大,股骨骨密度增加,这可能与阿仑膦酸钠抑制破骨细胞活性有关。