果桑茶的制备及功效初步研究

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果桑是一种可全株利用且“药食同源”的植物,其果、叶、枝、根中都含有丰富的营养物质和活性成分,具有清肺润燥,补肝明目,抗氧化,降血糖血脂,增强免疫力等多种功效,发展前景广阔。但目前果桑的开发重点主要是针对桑葚果实,对桑叶、桑枝、桑根的利用不充分,造成了果桑资源的浪费。本论文以果桑叶、桑枝皮、桑根皮为原料,采用混料设计,以降糖活性成分(1-DNJ、黄酮、多糖)为指标,确定果桑复配茶的最佳配比,并优化其冲泡条件,通过动物实验评估其降糖功效,同时研究了果桑茶对2型糖尿病模型小鼠肠道菌群的影响,制备得到具有良好降血糖效果和较高营养价值的新型果桑茶产品,旨在为提高果桑资源的综合利用价值提供有效途径。主要研究内容和结果如下:1、桑叶、桑枝皮、桑根皮营养成分及功能性成分分析。桑叶中含有较高的粗蛋白、灰分和粗脂肪,桑枝皮、桑根皮中含有较高的粗纤维。三种原料中都含有一定量的氨基酸且必需氨基酸齐全,营养价值较好。功能性成分方面,桑叶中黄酮含量最高,为50.84 mg/g,桑根皮中多酚及多糖含量皆最高,分别为59.85 mg/g、4.02 g/100g;桑枝皮中1-DNJ含量最高,为2.714 mg/g。2、果桑复配茶的制备。以多酚、黄酮、多糖、1-DNJ的溶出率为指标,确定果桑叶、桑枝皮、桑根皮的最佳粉碎目数分别为40~60目、60~80目、60~80目;以黄酮、多糖、1-DNJ为响应值,利用混料设计结合感官评价及对α-葡萄糖苷酶的抑制率得到了果桑复配茶的最佳配比为:果桑叶:桑枝皮:桑根皮为62:19:19;通过正交试验得到了最优的冲泡条件为:冲泡水温75℃,茶水比1:100,冲泡时间50 min。3、果桑复配茶的降糖功效研究。体外降糖研究表明,果桑复配袋泡茶冲泡液对α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶的抑制率分别为74.77%、68.04%,在此基础上构建2型糖尿病小鼠模型,设置GD-1组(含5%果桑复配茶高脂饲料)、GD-2组(含10%果桑复配茶高脂饲料)、GD-3组(果桑复配茶水提物200 mg/kg)三组试验,以二甲双胍(100 mg/kg)为阳性对照,连续给药28天,通过测定摄食量、饮水量、空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(INS)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(GHb A1c)及口服葡萄糖耐量(OGTT)等生化指标以评估果桑茶的降糖功效,结果表明:与正常组相比,模型组小鼠空腹血糖值一直处于高血糖水平,饮水量显著高于正常组;给药组中阳性药物组的降血糖能力最强,果桑茶三组不同剂量组之间降糖效果最佳的为GD-2组,其对空腹血糖(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)和糖化血红蛋白(GHb A1c)的降幅分别为40.05%、23.28%、15.73%,与阳性对照药相比均无显著性差异;GD-1组与GD-3组皆具有一定程度的降血糖作用,但效果不如GD-2组。4、应用高通量测序技术进行小鼠肠道菌群分析。分析结果显示,糖尿病小鼠肠道菌群物种的构成与其他各组相比存在明显差异,具体表现为嗜胆菌属、梭菌属等有害菌属的丰度增高,艾克曼菌属等有益菌属的丰度降低;Alpha多样性分析结果表明2型糖尿病小鼠肠道菌群多样性指数较正常组低,其余各组均较模型组有不同程度的增高,其中GDm组(含10%果桑茶高脂饲料)最高;Beta多样性分析结果表明,模型组小鼠肠道菌群的物种组成与其余各组存在差异,通过PCA分析及UPGM分析发现,GDm组与正常组小鼠肠道物种组成在一定程度上相似,表明果桑茶在调节糖尿病小鼠肠道物种组成趋于正常组方面具有一定的作用;LEf Se多级物种差异判别分析结果表明,对模型组肠道菌群影响较大的菌属为嗜胆菌属等有害菌属,而对其余各组影响较大的菌属为拟杆菌属等有益菌属。以上结果表明,果桑茶对糖尿病小鼠肠道菌群具有调节作用,表现在菌群组成及结构方面,果桑茶治疗组可通过增大有益菌群的丰度及降低有害菌群的丰度来改善糖尿病小鼠肠道菌群失调的症状。
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