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目的:三阴乳腺癌约占乳腺癌发病率的10~15%,以高度的恶性程度为特征,极易出现复发和转移,目前临床缺乏有效的治疗手段。肿瘤干细胞是一小群特殊的具有自我更新能力的肿瘤细胞,在具有肿瘤细胞一般的生物学活性之外,如无限增殖能力,同时也具有干细胞的相关特性。三阴乳腺癌中干细胞比例相对较高,可能与肿瘤的恶性程度、临床预后及对化疗的反应相关。在肿瘤干细胞中异常表达的microRNA能够调控干细胞功能,然而,目前仍缺乏有关三阴乳腺癌干细胞中特异性microRNA功能与机制的研究报道。 方法:运用高通量测序检测在三阴乳腺癌干细胞与非三阴乳腺癌干细胞之间差异表达的microRNA。通过肿瘤微球体形成实验和干细胞表面特异性分子标记物反应三阴乳腺癌干细胞自我更新等特性的变化。运用生物信息学分析联合表达谱测序预测mir-4319的下游靶基因,荧光素酶报告基因实验用于确定mir-4319在靶基因3’UTR区的结合位点。 结果: 1、测序结果显示,在三阴乳腺癌干细胞与非三阴乳腺癌干细胞之间中存在193个差异表达的microRNA。 2、生物信息学分析结果显示:差异表达的microRNA可能参与调控与肿瘤干细胞自我更新、增殖分化等有关的生物学进程。 3、mir-4319可以通过靶向E2F2调控三阴乳腺癌干细胞自我更新的能力,从而抑制三阴乳腺癌的恶性程度及转移潜能。 4、荧光素酶报告基因实验和挽救实验结果证明mir-4319通过靶向结合E2F23’UTR区调控三阴乳腺癌干细胞活性。 结论:mir-4319通过调控三阴乳腺癌干细胞的自我更新和成瘤能力抑制三阴乳腺癌的恶性程度,能够为指导临床三阴乳腺癌患者的靶向治疗奠定基础。