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第一部分耐药乳腺癌细胞外泌体横向转运microRNAs传递化疗耐药多西他赛和阿霉素是乳腺癌辅助化疗的两种基本药物,然而治疗过程中会不可避免地出现耐药现象,进而影响患者临床化疗疗效。近期研究表明外泌体能在异质性肿瘤细胞之间充当传播媒介来交换遗传物质,传递耐药性,加快肿瘤进展。目前,关于乳腺癌细胞来源的外泌体的特异性作用还尚不明确。本研究发现人敏感乳腺癌细胞系MCF-7/S可以从共育的耐药突变株MCF-7/Doc及MCF-7/Adr上获得增强的存活潜能。此外,耐药突变株分泌的外泌体(D/exo和A/exo)相较于敏感株外泌体(S/exo),能够显著调控细胞周期和药物诱导的凋亡。外泌体经RNA酶处理后,其对细胞周期和凋亡耐受的作用明显下调,提示外泌体的功能是部分依赖RNA的。利用微阵列和聚合酶链反应对D/exo、A/exo和S/exo内的微小RNA(microRNAs)表达谱分析证实这些外泌体选择性地装载microRNAs。当D/exo和A/exo被受体MCF-7/S细胞摄取后,某些microRNAs的表达水平在受体细胞中显著上调。通过靶基因预测和通路富集分析表明miR-100、miR-222和miR-30a与肿瘤发病机理、膜囊泡化和化疗失败等进程相关。最后,D/exo共育实验和microRNA模拟物转染实验证实富含miR-222的D/exo能够调节MCF-7/S细胞内靶基因的表达。我们的研究结果提示耐药乳腺癌细胞可以通过释放外泌体进而传递耐药性至敏感细胞,并且该作用可能与细胞间横向转移的某些特异性microRNAs有关。第二部分外泌体传递microRNAs减少乳腺癌细胞对阿霉素敏感性阿霉素是乳腺癌临床化疗的基石,显著提高了患者总生存,然而治疗过程中耐药现象会不可避免地出现。越来越多证据表明外泌体能充当遗传物质的载体,并在异质性肿瘤细胞之间不断转运生物活性分子例如microRNAs,为肿瘤进展提供促耐药环境。我们前期研究发现多西他赛耐药株来源的外泌体能通过传递microRNAs调节乳腺癌细胞化疗敏感性。因此,我们将实验进一步拓展,探索外泌体介导的microRNAs转运在阿霉素耐药株中的耐药传递现象。结果证实阿霉素耐药株来源的外泌体(A/exo)选择性包裹microRNAs,并且当A/exo与荧光敏感株细胞(GFP-S)融合后,A/exo中高表达的microRNAs在受体细胞中也显著增加。对A/exo中含量最丰富的30个microRNAs的预测靶点行基因本体论分析发现它们参与许多关键性生物进程。此外,A/exo不仅装载与自身形成、释放有关的microRNAs,还携带与Wnt信号通路有关的microRNAs。最后,共育实验表明富含microRNAs的A/exo能提高GFP-S细胞对阿霉素的耐受,改变GFP-S细胞内基因表达。我们的实验再次充实了前期研究,证明阿霉素耐药乳腺癌细胞通过转运外泌体内特异性microRNAs,传递耐药特性并形成促癌微环境。