【摘 要】
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本文主要研究了Clostridium thermocopriae sp.nov.JT3-3和Clostridium thermocopriae sp.nov.JT1二种菌分解纤维素的机制,各种不同碳源及小分子糖对菌体生长过程中各种酶活
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本文主要研究了Clostridium thermocopriae sp.nov.JT3-3和Clostridium thermocopriae sp.nov.JT1二种菌分解纤维素的机制,各种不同碳源及小分子糖对菌体生长过程中各种酶活力及代谢产物的影响.结果表明:菌体分解纤维素的机制可以分为吸附、挖空、水解三个阶段.JT1菌分解纤维素的能力高于JT3-3.从代谢产物的生成量看,纤维素碳源低于手纸碳源.JT3-3菌生成乙醇的能力优于JT1菌,但乙酸则反之.β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)JT3-3高于JT1菌,而纤维素内切酶(EC3.2.1.4)的活力则反之.对于JT3-3低浓度的葡萄糖抑制纤维素培养基的代谢产物乙醇的形成,对于手纸培养基则无影响.低浓度半乳糖与此相反,对纤维素培养基没有影响,而对于手纸培养基有抑制.低浓度的乳糖对两种培养基均无影响.对于JT1菌,低浓度的葡萄糖对纤维素培养基没有明显影响,抑制手纸培养基,而低浓度的乳糖半乳糖对两种培养基均有抑制.对JT3-3菌产发酵液经硫酸铵沉淀和DEAE-Cellulose DE52柱层析梯度洗脱后,SDS-PAGE检测得到电泳单点,确定纤维素内切酶的蛋白质分子量约为52kDa,β-葡萄糖苷酶的蛋白质分子量约为48kDa.纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的最适反应pH值都是pH6.5,纤维素内切酶的最适反应温度是80℃,β-葡萄糖苷酶的最适反应温度是40℃,10mM Ca<2+>和Mg<2+>对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力没有影响,高浓度的Ca<2+>和Mg<2+>、对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力有较弱的抑制作用,各浓度的Hg<2+>对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力都有很强的抑制作用.
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