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目的2型糖尿病是常见病、多发病且危害严重，并有不断上升趋势。大多数糖尿病病人的死亡与致残原因为：大血管动脉粥样硬化的并发症，也即糖尿病大血管并发症，包括心、脑血管病及周围血管病如冠心病、脑卒中、间歇性跛行和下肢坏疽。目前世界范围内糖尿病及其高危人群数量激增，因此探索糖尿病大血管并发症的危险因素并进行有效的防治是当前一个重大的公共健康课题。在糖尿病大血管病变的病理生理学研究中，普遍认为胰岛素抵抗、内皮功能紊乱和局部RAS激活等起重要作用。尤其内皮功能失衡是动脉粥样硬化的始动和核心环节，2型糖尿病在血管病变出现前数年就有内皮功能受损的标志物升高，而且内皮功能受损还常与胰岛素抵抗合并存在，两者相互协同，共同促进动脉粥样硬化的形成。以胰岛素抵抗为主因的代谢综合征中的各种异常表现被普遍认为是糖尿病大血管并发症的危险因素，因为它们大多可引起内皮细胞功能紊乱，那么除了高糖、高脂、高血压等这些可直接或间接作用于血管壁细胞的危险因素外，加大对其他类似因子的探索将为防治该种复杂病开辟新的道路。近期，有新的研究认为新生血管形成部分地参与了血管动脉粥样硬化的发生、发展，因此对血管生成抑制因子方面的研究也许将有助于发现遏制动脉粥样硬化进程的其它有力武器。内皮抑素（Endostatin，ES）即是这样一种同血管内皮生长因子（VEGF）作用相反、却又互为作用的细胞因子。方法1、酶联免疫吸附实验法（ELISA）检测100例2型糖尿病（T2DM）患者（34例T2DM无大血管病变、40例伴发一种大血管病变、26例伴发多种大血管病变）和30例健康对照者外周血内皮抑素（竞争ELISA法）、血管内皮生长因子VEGF（双抗体夹心ELISA法）表达水平的变化，探讨内皮抑素、VEGF与2型糖尿病大血管并发症的关系。2、原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分离、培养后，取HUVEC随机加入不同浓度葡萄糖液中培养，分为正糖对照组（5.6mmol／L Glu），高糖组（11.2mmol／LGlu、22.4mmol／L Glu组）。分别培养24、48、72、96小时后，收集各组不同作用时间点内皮细胞的总RNA和蛋白，采用RT-PCR法检测HUVEC中ES mRNA的表达，Western—blot法检测ES蛋白的表达，分析不同浓度葡萄糖对人内皮细胞内皮抑素在基因转录及蛋白翻译水平上的影响，探索高糖环境下内皮细胞内皮抑素的代谢特点。3、观察5.6、11.2、22.4mmol／L不同浓度葡萄糖液培养人脐静脉内皮细胞72h时，以western—blot法检测ES蛋白的表达、硝酸还原酶法检测相应培养上清液中NO含量变化，分析高糖对NO的产量和内皮抑素蛋白表达的影响；分别应用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、一氧化氮供体SNP、鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ干预高糖（11.2mmol／L Glu，72h，对照组）作用下的HUVEC，western—blot法检测各干预组HUVEC中ES蛋白的变化，探讨一氧化氮／环鸟苷酸（NO／cGMP）信号传导通路对高糖时人脐静脉内皮细胞表达内皮抑素调控的可能性。结果1、内皮抑素、VEGF在T2DM大血管病变各组（包括合并一种大血管病变组、合并两种以上大血管病变组）血清含量分别显著高于T2DM无大血管病变和健康对照组[内皮抑素：（32.4±15.6）ng／ml，（35.1±20.2）ng／ml vs （11.2±8.6）ng／ml，（9.9±6.7）ng／ml；VEGF：（133.5±36.8）pg／ml，（302.1±52.4）pg／ml vs（90.2±42.4）pg／ml，（81.3±33.5）pg／ml，P＜0.01)，两者浓度在健康对照和T2DM无大血管病变组间比较差异不显著；VEGF在伴发一种大血管病变、多种大血管病变组间比较表达水平显著上调[（133.5±36.8）pg／ml vs（302.1±52.4）pg／ml P＜0.01]，而内皮抑素的表达差异不显著；在T2DM伴发一种大血管病变组，内皮抑素和VEGF成线性正相关（r=0.540，P＜0.01）。2、11.2mmol／L葡萄糖组，内皮细胞中ES mRNA和ES蛋白表达水平随时间延长而升高，两者在第72、96h表达水平显著高于对照组(P72h＜0.05，P96h＜0.01)；22.4mmol／L葡萄糖组，内皮细胞ES mRNA和ES蛋白表达水平在24、48、72h随时间延长而增高，于72h时二者的表达水平显著高于对照组（P＜0.05），而96h时表达水平明显低于对照组（P＜0.05）；对照组中ES mRNA的表达不随时间延长而有差异性改变，但ES蛋白的表达水平随时间延长出现降低，96h其表达水平明显低于24h（P＜0.05）3、短时间作用下（72h），随葡萄糖浓度升高，HUVEC中ES蛋白的表达和上清培养液中NO的含量显著上调（与5.6mmol／LGlu组相比，P＜0.05）；NO合酶抑制剂L-NAME抑制ES蛋白表达强度，是对照组（11.2mmol／L，72h）的0.372倍（P＜0.01）；鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ抑制ES蛋白表达强度至对照组的0.406倍（P＜0.01）；一氧化氮供体SNP提高ES蛋白表达强度，是对照组的1.32倍（P＜0.05）。结论1、内皮抑素和VEGF在于2DM大血管病变的发生、发展中可能起作用，两者的变化在一定程度和条件下受自稳态调节机制的控制，血管生成致动脉粥样硬化产生是两种作用相反的细胞因子间自稳态平衡被打破失衡的结果。2、高浓度葡萄糖对HUVEC中ES mRNA和蛋白表达水平的影响是双向的，即短时间内起促进作用，具时间效应性；作用至一定时间后，高糖开始抑制HUVEC中ES mRNA和ES蛋白的表达。3、高糖短期作用时，HUVEC中内皮抑素蛋白表达水平和NO生成量随葡萄糖浓度升高而增加，具浓度依赖性；高糖时HUVEC中内皮抑素蛋白表达的调控可部分通过NO／cGMP传导通路实现。