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目的：
(1)检测纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)在人绒毛膜癌不同侵袭力细胞JEG-3和JAR内的表达,探讨FN高表达与绒毛膜癌侵袭转移的关系；
(2)研究氟尿嘧啶脱氧核苷(floxuridine,FUDR)对绒毛膜癌高侵袭力JEG-3细胞生长能力的抑制作用,并与5-氟尿嘧啶进行比较,观察两种药物影响JEG-3细胞生长能力的差异并比较药物作用后JEG-3细胞中FN的表达改变。
方法：
(1)运用Matrigel体外侵袭实验方法,检测两种绒毛膜癌细胞JEG-3和JAR侵袭能力,并比较差异；
(2)运用荧光定量-聚合酶链反应(real time-polymerase chainreaction,RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blotting)方法,检测绒毛膜癌细胞JEG-3和JAR中FN mRNA和蛋白表达情况,并比较两者间的差异；
(3)用不同浓度(0.05、0.25、0.5、2.5和5 ug/ml)氟尿嘧啶脱氧核苷(FUDR)和5-氟尿嘧啶(5-FU),分别处理体外培养的高侵袭性绒毛膜癌细胞株JEG-3,在处理后48小时,以MTT比色法检测两种药物对JEG-3细胞生长增殖的影响,计算相对生存率,比较两种药物抑制JEG-3细胞生长能力的差异并检测FN蛋白表达。
结果：
(1)Matrigel体外侵袭实验证实,JEG-3细胞较JAR细胞的侵袭能力明显增强(P＜0.01):
(2)在两种细胞中均检测到FN mRNA表达,相对低侵袭性JAR细胞,高侵袭性JEG-3细胞中FN mRNA表达明显增加(P＜0.001),JEG-3细胞中FN蛋白表达水平较JAR细胞亦明显增加(P＜0.05)；
(3)MTT抑制实验证实,FUDR和5-FU均对JEG-3细胞的生长能力具有抑制作用,且呈剂量依赖性。在5、2.5和0.5ug/ml药物浓度处理下,FUDR对JEG-3细胞生长抑制能力明显强于5-FU的作用(P＜0.05)；最低有效浓度0.5ug/ml处理后,JEG-3细胞FN蛋白表达水平以FUDR处理的较5-FU处理要明显降低。
结论：
(1)FN参与绒毛膜癌的发生和发展,与绒毛膜痛的侵袭和转移相关。
(2)FUDR能抑制高侵袭力绒毛膜癌细胞JEG-3生长能力,在一定剂量作用下,抑制能力强于5-FU。JEG-3细胞以FUDR处理的较5-FU处理FN蛋白表达水平降低。