【摘 要】
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根据猪瘦素受体基因胞外域序列(GenBank号:AF167719.1)设计并合成三对分别覆盖编码区55-1020位、1052-1851位、1686-2351位核苷酸的引物,以西藏小型猪肝脏总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片段。再以该三个特异性片段为模板,另外设计三对套式引物扩增瘦素受体基因胞外域编码区304—951位、1054-1623位、1687-2346位
【机 构】
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南方医科大学实验动物中心暨比较医学研究所,广州 510515 华南农业大学动物科学学院,广州 51
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根据猪瘦素受体基因胞外域序列(GenBank号:AF167719.1)设计并合成三对分别覆盖编码区55-1020位、1052-1851位、1686-2351位核苷酸的引物,以西藏小型猪肝脏总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片段。再以该三个特异性片段为模板,另外设计三对套式引物扩增瘦素受体基因胞外域编码区304—951位、1054-1623位、1687-2346位cDNA片段,将该三片段克隆人pMD18-T载体并转化感受态细菌E.coliDH5α测序并永久保存。此三片段经酶切后克隆到表达载体PRSETA的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建重组质粒pR-OBR-p、pR-OBR-m、pR—OBR-a。以上三个质粒在转化感受态细菌E.coliBL21(DE3)后,在IPTG诱导下促使重组菌pR-OBR-a表达了相对分子质量27655左右的重组融合蛋白。说明重组质粒pR-OBR-a在大肠杆菌BL21(DE3)中可表达两藏小型猪瘦素受体片段蛋白。
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目的:使用上肢精细测试系统对脊髓间充质干细胞治疗脑缺血的疗效进行行为学分析评价。方法:成年食蟹猴18只,手术前2个月用上肢精准测试系统对动物进行训练并采集本底数据。采用光化学法制作局部脑缺血模型,造模后4周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组,分别在缺血灶周围注射生理盐水、脊髓问充质干细胞5×106/只和1×106/只,造模后1d、3d、1w、2w、3w、4w及干细胞注射后1d、3
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