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背景骨质疏松是一种以骨量低下,骨微结构破坏,导致骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性代谢性骨病,严重影响着人们的健康和生活质量。药物治疗是骨质疏松治疗的最重要途径,但目前的抗骨质疏松药物大多成本较高,且有多种药物被证明存在增加肿瘤或心血管疾病发生几率的风险。因此,开发高效、副作用小、低成本的新型抗骨质疏松药物势在必行。OPG是成骨细胞分泌的一种细胞因子,能够作为诱饵受体结合破骨细胞分化因子RANKL,在一定程度上抑制破骨细胞分化和活性,从而降低骨吸收速率,因此OPG是治疗骨质疏松的一个重要靶点。本实验室已经建立了人OPG表达上调剂的稳定转染模型细胞系,可用于新型抗骨质疏松药物的高通量筛选。目的筛选具有上调人OPG表达活性的新型化合物,为开发新型抗骨质疏松药物提供先导化合物。方法应用本实验室建立的人OPG表达上调剂高通量筛选模型对40 000个化合物进行了筛选,从中获得具有OPG上调活性的化合物,对其进行量效关系的测定,并利用western blot方法验证其中活性较好的两个化合物对成骨肉瘤细胞U2-OS和Saos-2的OPG蛋白表达及分泌的影响。结果获得具有OPG表达上调活性的化合物37个,其中最高上调活性为2.42倍,其EC50为4.55μmol/L。化合物GO1-2和GO1-4在筛选模型上的上调倍数分别为1.91倍和1.54倍,EC50分别为2.13μmol/L和2.70μmol/L。胞内及细胞培养上清的western blot结果表明,在0～5μmol/L,化合物GO1-2和GO1-4以剂量依赖的方式提高U2-OS和Saos-2细胞的OPG表达水平,且能够促进其向细胞外的分泌,化合物GO1-2较GO1-4效果更为明显。结论应用本实验室建立的人OPG表达上调剂高通量筛选模型能够筛选得到具有OPG表达上调活性的化合物,化合物GO1-2和GO1-4能够提高成骨肉瘤细胞的OPG表达及分泌水平,可以作为新犁抗骨质疏松药物的先导化合物进行进一步的研究和开发。