一种能提高细胞蜡块制备成功率的方法

• 作 者: 宋朝君 于少娟 杨琨 金伯泉
• 发表日期: 2012年期
• 关键词: 细胞蜡块 免疫细胞化学 边缘效应

研究背景:细胞蜡块是将固定后的体外培养的细胞、原代细胞或胸水、腹水等体液标本中的细胞离心收集形成细胞团块后常规脱水、浸蜡、包埋后制成的,其优点是可制成多张切片并可长期保存,进行一系列免疫细胞化学和免疫组化染色,或进行电镜、原位杂交等实验,对于研究特定蛋白质在细胞和亚细胞水平的定位、表达水平及疾病的诊断和鉴别诊断等方面均具有重要的意义。目的:建立一种能提高细胞蜡块制备成功率的方法。方法:根据细胞数量的多少取不同规格的薄壁PCR管,细胞数量较少一定要取用容量小的PCR管,将热的30%蔗糖-琼脂溶液加入PCR管中至半满,待琼脂凝固后再向该PCR管中加入浓的细胞悬液,用水平转头2000rpm离心5min,弃上清液,必要后重复上述步骤。将上述PCR管浸入中性福尔马林溶液中固定12h后取出,小心切去PCR管底,轻轻用玻棒或加样器头把琼脂连同细胞团块顶出,小心将细胞团块和琼脂分开,将完整的细胞团块制作细胞蜡块。结果和结论:应用该方法制备细胞蜡块时不再需要大量的细胞,细胞团块不会破碎,经30余次试验,成功率可达100%。应用该方法制备的细胞蜡块中的细胞之间紧密贴合,可排除染色中的可能产生的边缘效应所导致的假阳性结果,从而满足日益增长的科研和临床病理诊断的要求。