【摘 要】
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人工miRNA(artificial miRNA,amiRNA)技术是一种新的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,它是通过置换miRNA前体中miRNA/miRNA*序列达到对特定靶基因的表达进行调节。本
【机 构】
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中国科学院遗传发育所,北京100101
【出 处】
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第三届全国小麦基因组学及分子育种大会
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人工miRNA(artificial miRNA,amiRNA)技术是一种新的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,它是通过置换miRNA前体中miRNA/miRNA*序列达到对特定靶基因的表达进行调节。本研究对己鉴定出的85个小麦miRNA的二级结构进行分析比较,以二级结构简单为筛选根据,从而确定tae-miR 171的前体序列作为amiRNA骨架的序列。根据其miRNA和miRNA*的配对特点,针对特定靶基因上的适当靶位点设计amiRNA序列,然后对miR171的前体序列进行人工设计,包括置换miRNA前体中miRNA/miRNA*序列和引入用于构建载体的双酶切位点等。所得植物转化载体在烟草中可高效表达,表明其为可以用于小麦转化的适宜amiRNA载体。本研究所获得小麦人工小分子RNA表达载体设计和构建的方法可针对小麦某个基因的多个同源拷贝,或一个基因的特异拷贝,设计高效特异的amiRNA,在小麦候选基因功能验证方面具有应用价值。
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