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三七是中医临床常用的散瘀止血药,三七总皂苷(panax notoginseng saponin,PNS)是三七的主要活性成分,含量高达12％.由于产地分布广泛,化学成分复杂,加之产地的地理、地质、气候等方面的影响,其有效成分含量相差很大,对其药用效果产生了很大的影响.更重要的是,各有效成分之间还存在复杂的协同作用,从而使整个药材发挥浑然一体的治疗效果.迄今为止,已从PNS 中分离并鉴别出20 余种单体成分,这些单体成分均属于达马烷型四烷三萜类皂苷,这些单体在PNS 中的含量由高到底为：Rg1(43.36％)、Rb1(41.08％)、R1(3.65％)、Re(0.22％),其他皂苷8.26％[1].所以,三七中有效成分的提取和测定已成为三七用于临床治疗的前提和基础.在中药有效成分的提取方面,常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法、超声波提取法等[2].在含量测定方面,常用的方法有紫外可见分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、气相色谱－质谱联用法、高效液相色谱法、高效液相色谱－质谱联用法和高效毛细管电泳法等[3,4].然而,从药物的溶解度方面考虑,三七总皂苷可溶于水、乙醇和甲醇,但甲醇毒性较大,纯水和低浓度的醇在提取时又容易产生糊化现象,故本章选择梯度乙醇为溶媒,建立了三七总皂苷的高效液相色谱含量测定方法,系统考察了加热回流法、超声提取法和索氏提取法等方法在提取三七有效成分的优缺点,并采用正交设计法对三七总皂苷的提取工艺进行了优化.方法：1.三七药材供试品溶液的制备：取三七药材,粉碎至粒径为40 目,干燥至恒重.准确称取三七粉20.0 g,以8 倍量70％的乙醇水浸泡30min,加热回流提取2 次,每次1.5h,合并2 次提取液,减压蒸干,残渣加乙醇溶解于500.0 mL 容量瓶中,加乙醇至刻度,4℃冷藏备用.2.分别取2.3.1 项下各方法所制备的三七药材供试品溶液10.0 μL,在拟定分析条件下,进样分析,测定各提取液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1 和Re的平均含量.分析条件为,色谱柱Agilent HC-C18(150 mm×4.6mm,5.0 μm)；流动相：0.1％磷酸水溶液(pH 3.2)：乙腈=78：22；检测波长：203nm；柱温：25℃；流速：0.8mL·min-1；进样量：20.0μL.色谱系统适用性试验：计算出色谱柱的理论塔板数,以人参皂苷Rg1计算为6859,以人参皂苷Re 计算为7925,以三七皂苷R1 计算为6637.实验后算出人参皂苷Rg1、Re 和三七皂苷R1 在样品中与其最近峰的分离度分别为2.6,2.1 和3.3.结果：1.三七皂苷R1、人参皂苷Rg1 和Re的线性范围分别为0.14～2.64 μg·mL-1、0.10～12.0 μg·mL-1和0.15～1.4 μg·mL-1；在拟定分析条件下,三七皂苷R1的平均回收率为97.8％,人参皂苷Rg1 和Re的平均回收率分别为100.3％和99.4％；重现性实验、精密度实验和稳定性实验的相对偏差均符合2005版中华人民共和国药典中药质量控制的要求.三七提取液中三七皂苷R1,人参皂苷Rg1 和Re的含量分别为9.42、16.52、3.42 mg·g-1.2.本文选择乙醇为溶媒进行三七的提取,通过正交设计实验考察了溶剂用量、浓度、提取次数和时间对三七皂苷Rl、人参皂苷Rg 和Re 提取率的影响,筛选出三七的最佳提取工艺为：8 倍量70％的乙醇加热回流提取3 次,每次1.0小时.结论：三七的最佳提取工艺为8 倍量70％的乙醇加热回流提取3 次,每次1.0小时.高效液相色谱法能对三七提取液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1 和Re 进行同时测定,可作为三七的质量控制方法.