SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定

• 作 者: 宋洋;张艳丽;钟部帅;王子玉;孟立;闫益波;王锋;
• 机 构: 南京农业大学动物胚胎工程技术中心，江苏，210095
• 出 处: 第五次全国动物生物技术学术研讨会
• 发表日期: 2010年期

本研究采用PCR方法从绵羊基因组中扩增β-乳球蛋白(β-lactoglobulin，BLG)3’、5’调控区，经TA克隆，在中间载体pcDNA3．1(-)的作用下，与人乳铁蛋白(Human Lactoferrin，hLF)连接，构建pcDNA3．1(-)-BLG-hLF，最终与载体元件pT2(SB转座子)连接，并以PCR、酶切及测序三类鉴定手段为保障，成功构建pT2-BLG-hLF。为下一步转染哺乳动物乳腺上皮细胞奠定基础，从而为成功建立乳腺生物反应器提供试验依据。