猪白细胞介素12在昆虫/杆状病毒双基因表达系统中的表达

来源 :中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwer5458269
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应用PCR方法扩增出编码猪白细胞介素12(pIL-12)亚基基因P35,将P40基因插入到杆状病毒表达载体pFastBacDUAL的BamHI和HindⅢ位点处于Ppolh启动子控制之下,将P35基因插入XhoI和SalI位点,处于P10启动子控制之下,分别构建成单/双基因转移载体.然后转化入含穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,筛选含重组杆状病毒载体的阳性菌株,获得三种重组转染质粒;提取重组杆状病毒DNA,分别转染昆虫细胞sf9,在适宜的条件下培养细胞表达重组pIL-12。
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