【摘 要】
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目的：探讨p38MAPK信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导人肺微血管内皮细胞(HPMEC)炎症反应中的作用。方法：①以浓度为10-6mol/L的AngⅡ刺激静止期的HPMEC,western blot检测0、5、10、20、40min时p38 MAPK的磷酸化水平,ELISA检测0、2、4、8、16、24 h时细胞培养上清IL-6、IL-8的水平;②分别以10-6 mol/L氯沙坦(AT1阻断
【机 构】
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东南大学附属中大医院ICU,东南大学急诊与危重病医学研究所 210009
【出 处】
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中华医学会2008年全国重症医学研讨会
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目的：探讨p38MAPK信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导人肺微血管内皮细胞(HPMEC)炎症反应中的作用。
方法：①以浓度为10-6mol/L的AngⅡ刺激静止期的HPMEC,western blot检测0、5、10、20、40min时p38 MAPK的磷酸化水平,ELISA检测0、2、4、8、16、24 h时细胞培养上清IL-6、IL-8的水平;②分别以10-6 mol/L氯沙坦(AT1阻断剂)和0、1、5、10、20μmol/L SB203580(p38 MAPK抑制剂)预处理HPMEC 1 h后,再以相同浓度AngⅡ刺激,检测p38 MAPK磷酸化水平。③分别以10-6mol/L氯沙坦和10 μmol/LSB203580预处理HPMFC 1 h后,再以10-6mol/L AngⅡ刺激,检测NF-κB对DNA的结合力和细胞培养上清IL-6、IL-8的水平。
结果：以10-6mol/L AngⅡ刺激HPMEC后5min p38MAPK的磷酸化水平达到最高(与0min比较,P<0.05),此后逐渐下降,但直至20min该效应仍明显高于0min组(与0min比较,P<0.05)。10-6mol/L氯沙坦和10 μmol/L SB203580可以完全阻断AngⅡ所致p38 MAPK的磷酸化效应(与AngⅡ组比较,P<0.05;与对照组比较,P>0.05)。10-6mol/L AngⅡ刺激HPMEC后细胞培养上清IL-6、IL-8分别于4h和2h开始明显升高(与0h组比较,P<0.05),并分别于8h(与2h组比较,P<0.05)与16 h(与8 h组比较,P<0,05)达到峰值。氯沙坦阻断AT1后,再以AngⅡ刺激,NF-κB活性增高、IL-6/IL-8升高效应均被完全阻断(与各AngⅡ组比较,P<0.05；与各对照组比较,P>0.05)；应用SB203580阻断p38 MAPK,再以AngⅡ刺激,NF-κB活性增高、IL-6/IL-8升高效应被明显抑制(与AngⅡ组比较,P<0.05:与对照组比较,P<0.05)。
结论：AngⅡ刺激HPMEC后通过AT1激活p38 MAPK信号通路；p38 MAPK信号通路在Ang Ⅱ介导的炎症反应中起重要作用。
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