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传统层析以硝酸纤维素膜或者色谱纸作为载体，以水或者有机溶剂作为流动相，根据样品中各物质的分配系数不同，因而扩散速度不同，从而达到分离的目的。虽然其一直应用于生物样品的分离检测，但由于微观结构无序、不可控，因此在应用中还存在着许多的不足之处。此外，胶体金作为免疫标记由于其制备昂贵，使得免疫层析试纸条造价较高。