【摘 要】
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模拟新生儿出生窒息,建立新生大鼠缺氧模型,研究缺氧对新生鼠脑神经源性分化因子(NeuroD)表达以及细胞凋亡和神经再生影响,为新生儿围产期窒息所致的缺血缺氧性脑病的防治研
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模拟新生儿出生窒息,建立新生大鼠缺氧模型,研究缺氧对新生鼠脑神经源性分化因子(NeuroD)表达以及细胞凋亡和神经再生影响,为新生儿围产期窒息所致的缺血缺氧性脑病的防治研究提供实验依据。参照Grojean的方法,将新生大鼠短暂置于100%氮气环境中,建立出生窒息的模型。96只新生大鼠随机分成对照组、缺氧20 min组,一亚组分13、20、27 d3个时间点取材,采用冰冻切片的免疫荧光检测NeuroD、石蜡切片的免疫组化检测BrdU表达的变化。另一亚组分6、20 d两个时间点,TUNEL法检测细胞凋亡。NeuroD免疫荧光结果显示,海马CA1区NeuroD免疫反应阳性产物呈红色荧光,在胞核表达。缺氧20 min组13、27 d的表达量均高于对照组,且在20 d表达量最高(P<0.01)。BrdU免疫组化结果显示,室下区BrdU免疫反应阳性产物呈棕黑色,在胞核表达。缺氧20 min组13、27 d的表达量均高于对照组,且在20 d表达量最高。TUNEL法检测出海马CA1区凋亡细胞深染为棕褐色,缺氧20 min后6 d凋亡细胞阳性率明显高于对照组,而20 d凋亡细胞阳性率与对照组比较无明显差异。提示短暂缺氧导致迟发性凋亡的神经元缺失,可诱导细胞增殖和神经元分化,触发神经发生,为受损的脑组织进行代偿性修复和神经功能的重建提供可能。
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