【摘 要】
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目的：探索培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养的影响,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。本实验研究了不同换液时间和不同培养基对E.tenel
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会
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目的：探索培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养的影响,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。本实验研究了不同换液时间和不同培养基对E.tenella子孢子在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中发育情况的影响。方法：本实验所用培养基以培养基础液为基础,共分为4组,T1、T2组为纯化后的子孢子用MEM199培养基悬浮,T3、T4组为纯化后的子孢子用RPMP1640培养基悬浮,T1、T3组为接种子孢子3h后换液,T2、T4组为接种子孢子4h后换液。换液后各组分别取爬片固定HE染色,各组在24 h、48 h分别再取爬片固定HE染色。染色后在显微镜下观察各组子孢子发育情况,并统计子孢子及滋养体和裂殖体的感染率。结果：(1)当接种E.tenella子孢子后4 h,H.E染色后,光学显微镜下观察E.tenella侵入组细胞内的入侵率,T1、T3组与T2、T4组差异显著(P＜0.05);(2)当接种子孢子后24 h,H.E染色后,光学显微镜下观察到滋养体形成率,各组间差异均不显著(P＞0.05);裂殖体形成率T1、T3、T4组与T2组差异显著(P＜0.05);(3)当接种子孢子后48 h,H.E染色后,光学显微镜下观察到滋养体形成率,各组间差异均不显著(P＞0.05);裂殖体形成率各组间差异均显著(P＜0.05).结论:(1)在相同培养基下(MEM199培养基或RPMR1640),与3 h换液相比,4 h换液更适于E.tenella子孢子的入侵;4 h换液后培养至24 h(或48 h),E.tenella子孢子发育更好。(2)相同培养时间下,与RPMR1640培养基相比MEM199培养基更适于E.tenella子孢子的发育。
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