【摘 要】
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目的：构建人解痉多肽(hSP)毕赤酵母表达载体,表达重组hSP,为功能研究奠定基础。方法：通过RT-PCR获得hSPcDNA片段,将目的基因插入毕赤酵母表达载体pGAPZαA,得到重组载体pGA
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038
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目的：构建人解痉多肽(hSP)毕赤酵母表达载体,表达重组hSP,为功能研究奠定基础。方法：通过RT-PCR获得hSPcDNA片段,将目的基因插入毕赤酵母表达载体pGAPZαA,得到重组载体pGAPZαA-hSP,转化大肠杆菌DH5 α,以Zeocin筛选重组质粒,发酵表达后行SDS-PAGE 分析及Western Blot检测。结果：经测序及PCR证实,hSPcDNA准确插入原核表达载体pGAPZ αA中,发酵表达后SDS-PAGE分析证明hSP的分子量约为32kD,Western Blot分析表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性。结论：上述结果表明成功构建出原核表达载体pGAPZαA-hSP 获得重组hSP,并为深入研究hSP奠定了基础。
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