【摘 要】
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目的 探讨外泌体穿梭miR-21对食管癌细胞生物学功能的影响及其与食管癌发病风险的关系。方法 DiI染料荧光标记食管癌细胞株EC9706培养上清来源的外泌体,应用活细胞实时成
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,南京210009
【出 处】
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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛
论文部分内容阅读
目的 探讨外泌体穿梭miR-21对食管癌细胞生物学功能的影响及其与食管癌发病风险的关系。方法 DiI染料荧光标记食管癌细胞株EC9706培养上清来源的外泌体,应用活细胞实时成像技术追踪观察外泌体的运动；应用荧光标记的miR-21 mimic转染EC9706,通过流式细胞术检测miR-21 mimic在供受体细胞间的转移效率,qRT-PCR技术检测受体细胞中miR-21的表达水平；将不同浓度GW4869与EC9706共培养,qRT-PCR检测GW4869对外泌体miR-21生成的影响；通过建立稳定的供受体细胞培养模型,应用EDU染色法、流式细胞技术、Transwell细胞体外迁移和侵袭试验来观察供受体细胞间非接触性细胞交流对受体细胞生物学功能的影响；应用生物信息学技术预测与上述生物学功能相关的miR-21靶基因,采用Western Blot技术分析预测靶基因的蛋白水平。
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