经乙二醇二缩水甘油醚处理的猪角膜后弹力层作为组织工程角膜内皮载体的实验研究

来源 :2013年第十九届全国眼外伤学术研讨会暨整合眼外科技术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dongxiaohu123
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  目的:检测经乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)处理后的猪角膜后弹力层的异种移植免疫抗原及猪内源性逆转录病毒的表达,评价经EGDE处理后的猪角膜后弹力层作为组织工程角膜内皮载体行异种移植的安全性.方法:新鲜猪角膜获取于当地屠宰场.通过大气泡分离法,分离猪角膜后弹力层.实验分为2组:Ⅰ新鲜猪角膜后弹力层,即对照组;Ⅱ经5% EGDE处理的猪角膜后弹力层,即实验组.以结膜作为阳性对照,通过免疫组织化学的方法,检测异种移植免疫抗原α-gal在新鲜猪角膜后弹力层和经EGDE处理的猪角膜后弹力层的表达.通过RT-PCR检测猪内源性逆转录病毒基因gag、 pol、env-A、B、C在正常猪角膜后弹力层及经EGDE处理的猪角膜后弹力层的表达.结果:通过大气泡分离法,成功获得了完整的猪角膜后弹力层.免疫组织化学结果显示,异种移植免疫抗原α-gal在正常的和经EGDE处理后的猪角膜后弹力层表达阴性.RT-PCR结果显示,猪内源性逆转录病毒基因gag、pol、env-A、B在正常猪角膜后弹力层呈阳性表达、 env-C呈阴性表达;而在经EGDE处理后的猪角膜后弹力层,猪内源性逆转录病毒表达阴性.结论:经EGDE处理后的猪角膜后弹力层从理论上可以避免由异种移植免疫抗原及猪内源性逆转录病毒引起的异种移植的风险,可以作为构建组织工程角膜内皮的载体.
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