【摘 要】
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目的 观察外源性胰岛素对脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤(AKI)大鼠血、尿和肾组织中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨胰岛素对AKI的治疗效应及其机制.方法 将72只健康SD雄性大鼠随机分为9组：正常对照组,模型组(分别为2h、6h、12 h、24 h组),治疗组(分别为2h、6h、12 h、24 h组),每组8只.予尾静脉注射4 mg/k
【机 构】
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中南大学湘雅二医院儿童医学中心,湖南 长沙 410011
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 观察外源性胰岛素对脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤(AKI)大鼠血、尿和肾组织中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨胰岛素对AKI的治疗效应及其机制.方法 将72只健康SD雄性大鼠随机分为9组：正常对照组,模型组(分别为2h、6h、12 h、24 h组),治疗组(分别为2h、6h、12 h、24 h组),每组8只.予尾静脉注射4 mg/kg LPS建立AKI模型,治疗组则在建模前2h腹腔皮下注射4 U/kg中效胰岛素,空白对照组和模型组则相应给予等量生理盐水.采集各组各时相点大鼠血、尿和肾组织标本.分别检测血清NGAL、MMP-9及C肽(ELISA法),检测血糖(快速血糖仪)、肌酐(Cr)浓度；检测和计算尿NGAL/Cr、MMP-9/Cr、β2微球蛋白(β2-MG)/Cr(ELISA法)；观察肾组织病理改变,以及测定肾组织NGAL和MMP-9表达水平(免疫组织化学染色方法)及肾组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平(ELISA法).结果 ①与正常对照组相比,模型组2h、6h、12 h、24h血、尿和肾组织NGAL表达水平均显著上升(P ＜0.01)；且尿NGAL/Cr、肾组织NGAL表达与肾组织损伤程度呈显著正相关(r =0.949、r=0.946,P＜0.01).②与正常对照组相比,模型组6h、12 h、24h血、尿和肾组织MMP-9水平显著上升(P＜0.01)；肾组织MMP-9表达与肾组织损伤程度呈显著正相关(r+0.852,P＜0.01).(③)模型组较正常对照组血清Cr差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组较模型组血清Cr亦无统计学差异(P＞0.05)；与正常对照组比较,模型组12 h、24h尿 β2-MG/Cr显著升高(分别为0.01＜P＜0.05、P＜0.01)；与模型组比较,治疗组于24h尿β2-MG/Cr显著升高(0.01 ＜P ＜0.05).④与模型组相比,治疗组各组血、尿和肾组织NGAL、MMP-9表达水平均显著降低(P＜0.05),且NGAL下降程度比MMP-9下降更为明显.⑤与正常对照组相比,模型组2h、6h、12h、24 h肾组织TNF-α水平均显著上升(P＜0.01)；较之模型组,治疗组各组肾组织TNF-α水平均显著降低(P＜0.05).⑥模型组血糖均比正常对照组明显增高(P＜0.01)；治疗组血糖基本维持在正常范围,6h、12 h血糖明显低于模型组(P＜0.05).⑦与正常对照组相比,模型组2h、6h、12 h、24 h血清C肽值均显著升高(P＜0.01)；较之模型组,治疗组6h、12 h、24 h血清C肽值均明显减低(P＜0.01).⑧血清NGAL与血清C肽、血糖呈正相关(r=0.797,P＜0.05、r=0.695,P＜0.05),与肾组织TNF-α呈正相关(r =0.853,P＜0.05).结论 ①LPS通过上调NGAL、MMP-9和TNF-α表达、诱导高血糖和胰岛素抵抗导致AKI的发生.②AKI时,血、尿、肾组织中NGAL均明显升高；其中,尿NGAL水平与肾组织NGAL、MMP-9表达、肾小管间质损伤程度呈正相关,提示测定尿NGAL水平对于AKI的早期诊断、病情程度判断和疾病转归有重要意义.③胰岛素治疗可能通过下调NGAL和MMP-9表达、以及针对胰岛素抵抗并降低血糖,减轻LPS诱导的AKI.
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