【摘 要】
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目的:确定乙肝病毒(HBV)转基因小鼠病毒标志物的表达及其肝脏病理改变情况,为HBV转基因小鼠用于抗乙肝药物评价提供依据.方法:取12只HBV转基因小鼠和12只正常小鼠,从血液转氨酶水平、病毒标志物表达和肝组织形态学改变三方面进行考察.HBV转基因小鼠源自正常小鼠受精卵经显微注射整合人类HBV全基因组后培育而成.抽提转基因小鼠肝组织和尾巴组织DNA,采用荧光定量PCR方法扩增检测HBV DNA水平
【机 构】
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浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,中国计量学院生命科学学院药学系 杭州市 310018
【出 处】
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浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛
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目的:确定乙肝病毒(HBV)转基因小鼠病毒标志物的表达及其肝脏病理改变情况,为HBV转基因小鼠用于抗乙肝药物评价提供依据.
方法:取12只HBV转基因小鼠和12只正常小鼠,从血液转氨酶水平、病毒标志物表达和肝组织形态学改变三方面进行考察.HBV转基因小鼠源自正常小鼠受精卵经显微注射整合人类HBV全基因组后培育而成.抽提转基因小鼠肝组织和尾巴组织DNA,采用荧光定量PCR方法扩增检测HBV DNA水平;分离血清采用ELISA方法检测小鼠乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)表达情况.同时,通过检测血清转氨酶(GOT/GPT)水平和肝组织病理变化,了解转基因小鼠的肝功能状况.
结果:HBV转基因小鼠肝组织和血清HBV DNA水平在2.0×103-1.0×107copies/ml之间;血清HBsAg和HBeAg呈阳性，说明转基因鼠所整合的HBV基因组可复制表达，并装配和分泌病毒颗粒。转基因小鼠血清GOT和GPT水平略高于正常小鼠;肝组织病理检查显示虽无显著病理变化，但局部细胞形态和排列出现轻微改变，肝细胞质略见疏松淡染，汇管区小叶间动静脉略有扩张，与转氨酶的升高相吻合.说明 HBV转基因小鼠虽处于免疫耐受状态，但也有微弱的免疫反应使其出现轻微的肝损伤。
结论:HBV转基因小鼠体内HBV的复制呈活跃状态，能够模拟乙肝患者体内HBV的复制，可以作为抗乙肝药物评价的疾病模型。
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