【摘 要】
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禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)原生质体遗传转化技术是建立禾谷镰孢菌突变体文库及研究其功能基因组的一种重要方法,本文以禾谷镰孢菌Y-A为供试菌株,研究酶解材料、
【机 构】
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南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室,南京210095
【出 处】
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中国植物病理学会2012年学术年会
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禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)原生质体遗传转化技术是建立禾谷镰孢菌突变体文库及研究其功能基因组的一种重要方法,本文以禾谷镰孢菌Y-A为供试菌株,研究酶解材料、酶组合、酶浓度、酶解时间、酶解温度和最佳酶解材料的量对禾谷镰孢菌原生质体制备的影响,优化胞壁降解酶系统,并将1.7kb的潮霉素磷酸转移酶基因片段(hph)转化到供试菌株中,计算转化效率,PCR验证转化子.结果表明,制备禾谷镰孢菌原生质体最适宜的条件为每毫升2％崩溃酶(Drislase)和2％蜗牛酶(Snailase)混合酶液中加入0.12g幼殖体,30℃酶解1.5h.
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