基于超高压液相色谱-串联质谱技(UPLC-MSMS)的多不饱和脂肪酸代谢组学研究方法

来源 :第11届全国脂质与脂蛋白学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iamphfeng
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目的:Omega-3和omega-6多不饱和脂肪酸(n-3,n-6PUFA)是哺乳动物饮食的重要组成部分.在生物体内,n-3,n-6PUFA主要通过环氧化物酶(cox)、脂氧化物酶(LOX)和细胞色素P450酶(CYP450)等三大通路和自身氧化过程被代谢成多种功能重要的脂质信号分子.近年来n-3PUFA(EPA,DHA等)的代谢产物也开始受到人们的关注,如Resolvin等在炎症反应中发挥重要的作用.由于n-3,n-6PUFA代谢产物种类众多且功能重要,在有限的生物样品中同时获得多种代谢产物的定量信息具有重要的意义.方法:考虑到各代谢产物之间的结构相似性以及在生物样品中较低的含量,使用具有高分离度和高分析效率的超高压液相色谱(UPLC)分离样品中的PUFAs,并使用具有高灵敏度、高特异性的三重四极杆质谱QTRAP5500,利用多反应监测(MRM)的扫描模式检测各种PUFA代谢产物,从而建立了n-3,n-6PUFA的UPLC-MS/MS代谢组学研究方法。结果:建立的UPLC-MS/MS代谢组学研究方法可在18分钟内分析34种n-6PUFA代谢产物和40种n-3PUFA代谢产物,定量限为0.1-5pg,定量标准曲线R>0.98。结合优化后的样品前处理方法,进行了血浆、组织和尿液等样品的代谢组学研究。结论:基于UPLC-MS/MS的PUFA代谢组学方法具有高灵敏度、高特异性、高检测通量、高定量精准度以及良好的重现性,能够从有限的生物样品中同时获得多种PUFA代谢产物的定量信息,对研究PUFA在生理病理过程中的意义具有广泛的应用前景。
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