【摘 要】
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目的 肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumornecrosisfactorreceptor-associatedfactors,traf6)是肿瘤坏死因子超家族和Toll样/白细胞介素-1受体超家族重要的接头分子,在胸腺上皮细胞的分化、骨代谢、先天性和特异性免疫反应及胚胎正常发育中都发挥着重要的作用。本研究旨在运用CRISPR/Cas9 基因编辑技术在斑马鱼中对traf6 基因进行敲除,研究其对斑马
【机 构】
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中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔药创制重点实验室,广州 510380
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目的 肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumornecrosisfactorreceptor-associatedfactors,traf6)是肿瘤坏死因子超家族和Toll样/白细胞介素-1受体超家族重要的接头分子,在胸腺上皮细胞的分化、骨代谢、先天性和特异性免疫反应及胚胎正常发育中都发挥着重要的作用。本研究旨在运用CRISPR/Cas9 基因编辑技术在斑马鱼中对traf6 基因进行敲除,研究其对斑马鱼骨骼发育的影响。方法 运用CRISPR/Cas9技术,构建了斑马鱼traf6 基因缺失突变体,通过表型分析、荧光定量PCR 检测、组织病理切片等研究方法对突变体骨骼进行了较为细致的观察分析。结果 表型分析发现traf6 杂合突变斑马鱼发育较野生型斑马鱼无明显异常,traf6 纯合突变斑马鱼胚胎骨骼形态发育受到严重抑制,多个骨代谢相关基因表达量均明显下降；traf6 纯合突变体；鳃、鳍条、脊柱等发育畸形。结论 借助CRISPR/Cas9 基因编辑技术获得traf6基因敲除斑马鱼,纯合突变斑马鱼骨骼明显异常,为研究traf6在骨骼发育中的作用机制提供了重要实验条件。
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