【摘 要】
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目的 观察烯脂酰辅酶A水合酶短链1 (ECHS1)对人HepG2细胞凋亡的影响.方法 构建ECHS1基因的干扰质粒,转染HepG2细胞后通过嘌呤霉素筛选稳定干扰ECHS1的细胞株(HepG2-siECH
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目的 观察烯脂酰辅酶A水合酶短链1 (ECHS1)对人HepG2细胞凋亡的影响.方法 构建ECHS1基因的干扰质粒,转染HepG2细胞后通过嘌呤霉素筛选稳定干扰ECHS1的细胞株(HepG2-siECHS 1),并利用Real time-PCR和Western blot验证其干扰效率.利用TUN EL及流式细胞仪术检测ECHS1干扰后HepG2细胞凋亡情况.结果 成功构建了ECHS1的干扰质粒；Real time-PCR和 Westem-blot验证了ECHS1干扰的HepG2细胞株中ECHS l表达低于zepG2-Pu6对照组(P＜0.05)；流式细胞仪术显示HepG2-siECHSl组细胞株凋亡率(14.98±1.07)％,HepG2-Pu6组(10.55±0.19)％,两者差异有统计学意义(P＜0.05)；TUNEL实验显示HepG2-siECHS 1组细胞株凋亡率(9.81±1.14)％,HepG2-Pu6(1.81±0.21)％,两者差异有统计学意义(P＜0.05)；较Pu6对照组而言,ECHS1干扰后抑癌基因p53、促凋亡蛋白Bax及Bid均表达增加.结论 ECHS1可能通过线粒体途径调控HepG2细胞凋亡.
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