桂枝挥发油对内毒素中毒小鼠的保护作用

来源 :中华中医药学会中药实验药理分会第十二次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyk3601
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  目的:临床上脓毒症的死亡率较高,而脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,内毒素)与脓毒症中炎症反应关系密切,脓毒症中可见内毒素中毒的症状.桂枝挥发油具有抗炎、抗肿瘤和抗病毒等作用,其抗炎机制与抑制NF-κB 信号通路相关.但尚未见报道桂枝挥发油对内毒素中毒模型小鼠的保护作用,本文主要观察桂枝挥发油对内毒素中毒小鼠模型的保护作用及机制,旨在丰富桂枝挥发油的抗炎作用研究.方法:将小鼠随机分为空白对照组、LPS 组、地塞米松组(5 mg/kg)及0.174 g/kg、0.348g/kg 桂枝挥发油组.除地塞米松组外,药物组灌胃给予相应剂量的桂枝挥发油(0.2 mL/10 g),空白对照组和LPS 组给予等体积的0.3%吐温溶液,连续给药5 天.地塞米松组于第4、5天腹腔注射给药(0.1 mL/10 g),共2 次.末次给药30 min 后,除空白对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组动物均腹腔注射15 mg/kg 的LPS 生理盐水溶液(0.1 mL/10 g),构建内毒素中毒小鼠模型.于造模后12 h 观察动物的活动状态,并处死动物.应用全自动血液分析仪测定动物全血白细胞计数(WBC)和血小板计数(PLT),采用ELISA 法和液相蛋白芯片技术测定血清中前炎症因子(IL-1β、IL-18、IL-5、IL-10、INF-γ 和TNF-α)及趋化因子(MCP-1、M-CSF、GM-CSF、MIP-1α 和MIP-1β)的含量,称量并计算小鼠肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及胸腺指数,制作肺组织的HE 染色病理切片及计算肺组织切片中嗜中性粒细胞的数目.采用RT-PCR 法测定小鼠肺组织中NF-κB(p65)、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β 和IL-18 mRNA 的表达量.结果:与模型组相比,桂枝挥发油组动物活动量增加,精神状态好转.与空白对照组比较,模型组动物全血WBC 计数显著升高,PLT 计数显著降低,肝脏、脾脏、肺脏、肾脏指数显著增加,而胸腺指数显著降低,桂枝挥发油对模型小鼠WBC、PLT 计数及脏器指数的异常表现影响较小.0.174 g/kg 桂枝挥发油能有效降低模型小鼠血清中IL-18、INF-γ 含量,0.348 g/kg 桂枝挥发油显著降低血清中INF-γ、IL-1β、MCP-1、M-CSF 和MIP-1β 水平.桂枝挥发油对LPS 所致肺组织的病理学变化有一定改善作用,0.348 g/kg 桂枝挥发油显著降低肺组织切片中嗜中性粒细胞的数目.桂枝挥发油对模型小鼠肺组织中p65、NLRP3、IL-1β 和IL-18 mRNA 的表达均体现出一定下调作用,其中0.174 g/kg 剂量显著抑制NLRP3 mRNA的表达,0.348 g/kg 桂枝挥发油显著抑制IL-1β mRNA 的表达.结论:桂枝挥发油通过其抗炎效应对LPS 诱导的内毒素中毒模型小鼠发挥保护作用,其机制可能与调节NLRP3 炎症小体信号通路相关.
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