【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组5非翻译区(UTR)对病毒复制转录等生物合成过程至关重要,但其发挥作用的机制尚不清楚.本实验室在北美型(pAPRRS)与欧洲型PRRSV(pSHE)感染性克隆骨架上,分别在各自的5 UTR与ORF1之间插入"at"形成NdeⅠ位点,由此产生的两个突变全长克隆pTLNd4和pSHEnde,经过转染和传代证明突变位点的引入不影响两者的感染性.在此基础上,将两型
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241 广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组5非翻译区(UTR)对病毒复制转录等生物合成过程至关重要,但其发挥作用的机制尚不清楚.本实验室在北美型(pAPRRS)与欧洲型PRRSV(pSHE)感染性克隆骨架上,分别在各自的5 UTR与ORF1之间插入"at"形成NdeⅠ位点,由此产生的两个突变全长克隆pTLNd4和pSHEnde,经过转染和传代证明突变位点的引入不影响两者的感染性.在此基础上,将两型5UTR进行互换,所构建的突变体克隆pTLV8和pSHSP5中,前者具有感染性,后者则是致死性突变体.在对pSHSP5以及pTLV8的二级结构预测中发现,嵌合突变体pTLV8的5端虽然与亲本pAPRRS的二级结构差异很大,但保留了TRS所在的最突出的茎环结构,且TRS与ORF1的AUG均位于最顶端的loop上.而pSHSP5的此茎环结构则遭到了破坏.对另一突变体,pPa2(在5UTR和ORF1之间插入"aatt"形成Pac Ⅰ的酶切位点)的研究中也发现只要突变破坏了顶端loop结构.对病毒就是致死性的.这也佐证了此茎环结构的重要性.综上所述,本研究证明了TRS所在的顶端loop结构是调控病毒复制转录过程的关键顺式作用元件之一.任何对其结构破坏的突变都会成为致死性突变.
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