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目的:对前期蛋白质组学技术筛选出的子痫前期患者血清中的差异蛋白进行重复并与视黄醇结合蛋白4(Retinol binding protein 4)进行验证.探讨RBP4是否具备成为子痫前期生物标志物的前景及在子痫前期发病过程中的作用机制.
方法：本课题通过PLLBs处理10例子痫前期患者及10例正常妊娠妇女血清,富集血清中低丰度蛋白,后进行1D胶联合色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)分析.筛选出表达有显著差异的蛋白.后期对6例子病前期患者及7正常妊娠妇女血清进行Western blot验证.对69例子痫前期患者及30例正常妊娠妇女血清中RBP4浓度进行ELISA测定.对子痫前期患者及正常妊娠妇女胎盘进行免疫组化观察RBP4在胎盘中的表达.最后对胎盘组织中RBP4 mRNA的表达通过real-time PCR进行测定.
结果:蛋白质组学研究，子痫前期与正常妊娠相比共有58种表达明显差异的蛋白,其中上调蛋白35种,下调蛋白23种.Western blot测定RBP4灰度值结果:子痫前期患者及正常妊娠妇女血清相比PE vs Control:2366.98±33.19SD VS 4905.32±78.47SD,P＜0.05;ELISA测定子痫前期患者血清及正常妊娠患者血清中RBP4浓度:子痫前期患者RBP4均值66.0ng/mL,四分位差42.0-77.2ng/mL vs正常妊娠妇女RBP4均值99.3ng/mL,四分位差43.1-266.8ng/mL,P=0.015;免疫组化结果:子痫前期患者及正常妊娠妇女胎盘中均有RBP4的表达,正常妊娠胎盘VS子痫前期患者胎盘细胞密度:4363.54±380.31VS 3012.65±625.28,正常妊娠胎盘VS子痫前期胎盘光密度:0.63±0.37 VS 0.38 VS 0.05,且差异有统计学意义.Real-time PCR结果显示，子痫前期患者胎盘中RBP4 mRNA表达明显低干正常妊娠妇女,且差异有统计学意义.
结论:对PLLBs处理后的血清进行1D胶联合LC/MS/MS是一种有效的寻找疾病生物标志物的技术.RBP4在子痫前期患者中表达显著下调,从而导致机体低代谢状态,为子痫前期的发病机制提出了新的思路,且RBP4有望成为预测子痫前期发生的生物标志物值得深入探索.