【摘 要】
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目的：过氧化酶体增殖物激活受体(PPAR)是一类配体依赖的转录因子,激活后结合于靶基因启动子上游的一段特定DNA序列——过氧化酶体增殖物反应元件(PPRE),从而调节靶基因的转录
【机 构】
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湖北省武汉市传染病医院 武汉 430022
【出 处】
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全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议
论文部分内容阅读
目的：过氧化酶体增殖物激活受体(PPAR)是一类配体依赖的转录因子,激活后结合于靶基因启动子上游的一段特定DNA序列——过氧化酶体增殖物反应元件(PPRE),从而调节靶基因的转录。依据PPAR的作用机理建立基于报告基因的靶向PPRE的转录调节模型,并观察不同浓度的PPAR特异性配基对上述模型的影响。
方法：PCR扩增获得乙酰辅酶A氧化酶(ACO)启动子上包含PPRE的片段,构建重组报告质粒pGL3-PPRE,将此质粒单独或与PPARa或γ的真核表达质粒(pSG5-PPARα、pSG5-PPARγ,)共转染到HEK293细胞中,通过测定荧光素酶(Luc)活力来分析非诺贝特对PPARα激活的作用以及吡格列酮和15d-PGJ2对PPARγ途径的影响。
结果：在pGL3-PPRE和pSG5-PPARα共转染的HEK293细胞中,荧光素酶的表达受非诺贝特的诱导,并呈现一定的剂量依赖关系;在共转染pGL3-PPRE和pSG5-PPARγ的HEK293细胞中,荧光素酶的表达则受吡格列酮、15d-PGJ2的诱导,也呈现一定的剂量依赖关系。
结论：在HEK293细胞中建立了基于报告基因的PPRE转录调节模型,用此模型可以进行PPARα或γ配基的筛选。
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