【摘 要】
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目的:探讨抗凝是否完全、冷藏时间长短及冻融次数这3种标本因素对全自动磁珠法提取全血DNA浓度和纯度的影响.方法:全血以EDTA抗凝.290份新鲜冷冻标本按抗凝是否完全分完全
【出 处】
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第十六届中南地区输血学术交流暨国际隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)研讨会
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目的:探讨抗凝是否完全、冷藏时间长短及冻融次数这3种标本因素对全自动磁珠法提取全血DNA浓度和纯度的影响.方法:全血以EDTA抗凝.290份新鲜冷冻标本按抗凝是否完全分完全抗凝组(231份)和不完全抗凝组(59份).330份完全抗凝标本按冷冻时间分新鲜冷冻组(-20℃冰冻7天内,231份)、新鲜冷藏组(4℃冷藏<7 d,62份)与陈旧冷藏组(4℃冷藏>24 d,37份).32份完全抗凝新鲜冷冻标本反复冻融后提取DNA,按冻融次数分1次冻融、2次冻融和3次冻融.采用全自动磁珠法提取全血DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度(OD260/280).统计分析各组DNA浓度与纯度间差异.结果:完全抗凝组DNA浓度、纯度高于不完全抗凝组(P<0.05);新鲜冷冻组、新鲜冷藏组与陈旧冷藏组DNA浓度、纯度呈递减趋势(P<0.05);1次冻融DNA浓度和纯度高于2次冻融和3次冻融(P<0.05);2次冻融DNA纯度高于3次冻融(P<0.05),但浓度下降不显著(P>0.05).结论:抗凝不完全、冷藏时间长及冻融次数多均会使DNA量和纯度下降.相比较而言,抗凝不完全和冷藏时间长影响更大.
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