【摘 要】
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目的 探索对阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)进行菌落PCR快速鉴定的简便方法.方法 应用直接菌落法、冻融法、玻璃珠法、酶解法等4种DNA粗提后的菌落PCR技
【机 构】
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北京军区总医院全军皮肤损伤修复研究所
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目的 探索对阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)进行菌落PCR快速鉴定的简便方法.方法 应用直接菌落法、冻融法、玻璃珠法、酶解法等4种DNA粗提后的菌落PCR技术对T.asahii 标准株进行敏感性评价,在此基础上应用16株T.asahii的103CFU/mL菌悬液1μL进行痕量扩增阳性率的比较,并与DNA常规提取法PCR结果进行比对.结果 玻璃珠法、冻融法的敏感性为101CFU/mL,直接菌落法、常规提取法的敏感性为102CFU/mL,酶解法未见特异性条带.玻璃珠法、冻融法、直接菌落法、常规提取法的痕量样本扩增阳性率分别为100％、75％、75％、50％,酶解法未成功扩增出目的产物.结论 直接菌落法、冻融法和玻璃珠法为基础的菌落PCR均可较理想地用于T.asahii的快速鉴定,尤其是基于玻璃珠法的菌落PCR技术,具有经济、便捷、敏感、高效的特点,适合痕量T.asahii的快速检测,对T.asahii感染的早期诊断鉴定具有重要价值和意义.
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