【摘 要】
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本文旨在探讨硫色曲霉木聚糖酶在毕赤酵母中的表达情况。按照硫色曲霉木聚糖酶基因xynB序列设计引物,PCR扩增获得编码成熟蛋白的基因片段,EcoRI/XbaI双酶切后连接到pGAPZαA
【机 构】
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农业部饲料工业中心,中国农业大学,北京,100094
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本文旨在探讨硫色曲霉木聚糖酶在毕赤酵母中的表达情况。按照硫色曲霉木聚糖酶基因xynB序列设计引物,PCR扩增获得编码成熟蛋白的基因片段,EcoRI/XbaI双酶切后连接到pGAPZαA载体上,获得重组表达载体pGAP-xynB.将pGAP-xynB用BspHI线性化后,电击转化毕赤酵母X-33菌株的感受态细胞,经过筛选获得分泌表达的重组菌株.将重组菌株接种YPD液体培养基,28℃振荡培养2～3天后取上清液分析,SDS-PAGE检测结果表明,表达蛋白的分子量大小约为27kDa.酶学性质分析表明,该木聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适pH值为4.4.
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