【摘 要】
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目的探寻蚓激酶通过影响Wnt/β-catenin信号通路对NRK-52E细胞抗氧化应激的作用机制。方法将NRK-52E细胞分为:正常对照组(G1),蚓激酶组(G2)和氯化锂(G3,LiCl)组。其中蚓激酶
【机 构】
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西南医科大学中西医结合学院; 四川大学生物治疗国家重点实验室; 西南医科大学附属中医医院;
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目的探寻蚓激酶通过影响Wnt/β-catenin信号通路对NRK-52E细胞抗氧化应激的作用机制。方法将NRK-52E细胞分为:正常对照组(G1),蚓激酶组(G2)和氯化锂(G3,LiCl)组。其中蚓激酶浓度为300U/ml,氯化锂浓度20mmol/L。氯化锂是Wnt/β-catenin信号通路激动剂,作为本实验阳性对照组。免疫荧光观察β-catenin蛋白在细胞内的分布,CCK-8试剂盒检测各组NRK-52E细胞的增殖能力,RT-PCR和Western blotting检测各组细胞内β-catenin含量的表达。结果1.免疫荧光:与正常对照组相比,蚓激酶组β-catenin蛋白在细胞质内表达增多,LiCl组β-catenin蛋白在细胞膜上表达增多;2.CCK8:蚓激酶组与正常组细胞增殖能力没有明显区别,LiCl组细胞增殖能力下降;3.RT-PCR:与正常组相比,蚓激酶组β-catenin的mRNA表达量降低,LiCl组β-catenin的mRNA表达量升高;4.Western blotting:与正常组相比,蚓激酶组β-catenin的蛋白表达下调,LiCl组β-catenin的蛋白表达上调。结论蚓激酶可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,使NRK-52E细胞产生抗氧化作用。
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