【摘 要】
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羟基乙酸是一种重要的医药、化工中间体,传统的生产羟基乙酸的方法是采用化学合成法。利用脱卤酶对氯乙酸脱卤生成羟基乙酸,反应条件温和,产品纯度较好。但现有的脱卤酶对氯
【机 构】
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浙江大学材化学院生物工程研究所 杭州 310027
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羟基乙酸是一种重要的医药、化工中间体,传统的生产羟基乙酸的方法是采用化学合成法。利用脱卤酶对氯乙酸脱卤生成羟基乙酸,反应条件温和,产品纯度较好。但现有的脱卤酶对氯乙酸的耐受性不强且菌种产酶能力低。脱卤产物氯离子能够与硫氰酸汞反应生成硫氰酸根,硫氰酸根可与三价铁离子结合产生在460nm 处的特异吸收峰。本文基于该显色法利用96 孔板建立了高通量筛选方法。在对从自然界中筛选获得的具有产卤乙酸脱卤酶能力的假单胞菌进行了紫外和微波诱变,利用高通量筛选方法获得了一株高产菌株,其产酶能力为 217 U/L,相比于出发菌株,产酶能力提高了3倍。对该菌种的培养基和产酶条件进行优化，确定蔗糖为较佳的辅助碳源,在培养12h后添加底物诱导12h,产酶量最高可达619.6U/L。
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