二甲基甲酰胺诱导H9c2心肌细胞凋亡机制的初步实验研究

来源 :第十四届全国劳动卫生与职业病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caacmis487
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  目的 观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2 心肌细胞凋亡过程中胞浆p65、核内p65、总蛋白中p-IκB 以及胞浆Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2 水平的变化,探讨DMF引起H9c2 心肌细胞凋亡的可能机制.方法 体外培养的H9c2 心肌细胞给予200mmol/L DMF染毒,Western Blotting 法检测染毒0h、2h、4h、6h、8h、12h 后胞浆p65、核内p65、总蛋白中p-IκB 的蛋白表达水平以及染毒0h、2h、4h、8h、12h、24h 后胞浆Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2 的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学技术(IFC)对染毒不同时间后的细胞Cyt-c 进行定位.结果 与对照组相比,除12h 组外,各组胞浆p65 蛋白表达水平下降,核内p65 蛋白表达水平上升,p-IκB 蛋白表达水平上升,差异均有统计学意义(F 值分别为7.77、33.11、90.25,P<0.01);其中,染毒12h 时,胞浆p65 水平较对照组略高,p-IκB 水平较对照组略低,差异均无统计学意义(P>0.05).并且,与对照组相比,各组Cyt-c 蛋白表达水平上升,Cleaved caspase-3 蛋白表达水平上升,Bcl-2 水平蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(F 值分别为51.42、503.68、73.37,P<0.01);其中,染毒12h 时,Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2 水平变化较大,与0h、2h、4h、8h 组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).另外,IFC 对细胞Cyt-c 检测显示,随着DMF 染毒时间的延长,Cyt-c 逐渐从线粒体释放到胞浆内.结论 NF-κB 信号通路与线粒体通路参与了DMF 诱导的H9c2 心肌细胞凋亡.
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