【摘 要】
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采用茶陵野生稻、东乡野生稻、小粒野生稻3个野生稻品种进行抗性候选基因转化与克隆研究。选用9对引物分别对东乡野生稻、小粒野生稻与茶陵野生稻的总DNA进行了引物扩增筛选,
【机 构】
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湖南农业大学农学院,湖南长沙410128国家杂交水稻工程技术研究中心,湖南长沙410125
【出 处】
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第五次全国植物分子育种代表大会暨学术交流会
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采用茶陵野生稻、东乡野生稻、小粒野生稻3个野生稻品种进行抗性候选基因转化与克隆研究。选用9对引物分别对东乡野生稻、小粒野生稻与茶陵野生稻的总DNA进行了引物扩增筛选,结果表明第5对(WR-1、WF-1)和第9对(S2、AS3)引物的扩增效果最好,主要表现为带型最清楚,非特异性扩增最少。通过1μl(12.5μmol)、2μl(25 μmol)、4μl(50 μmol)、8μl(100 μmol)和16μl(200μmol)5种不同简并引物浓度的试验结果表明,16μl(200 μmol)引物浓度的扩增效果最好,其电泳带型最清楚,非特异性的扩增也最少,符合简并引物合成原则,即简并性好且简并性不高。用第5对引物(WR-1、WF-1)对茶陵野生稻总DNA进行扩增、回收、克隆及测序分析,初步得到4类不同的抗性候选基因材料；用第9对引物对东乡野生稻总DNA进行扩增、回收、克隆,得到34个阳性重组子。
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