【摘 要】
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目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)在石英致人胚肺成纤维细胞(HELF)DNA双链断裂修复中的作用。 方法：200μg/ml的石英刺激HELF和用显性失活突
【出 处】
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华北地区第十九届职业病防治工作暨学术研讨会
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目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)在石英致人胚肺成纤维细胞(HELF)DNA双链断裂修复中的作用。
方法：200μg/ml的石英刺激HELF和用显性失活突变体抑制PI3K功能的HELF(DN-△p85)不同时间。免疫印迹法检测磷酸化H2AX(γ H2AX)的水平以及DNA依赖性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的组成成分Ku70、Ku8和DNAPKcs的蛋白水平,并用Image-Pro plus 6.0软件对条带光强度进行半定量分析。中性彗星实验检测DNA双链断裂损伤,用彗尾DNA百分含量值观察DNA双链断裂损伤程度变化,并计算DNA修复能力。
结果：γH2AX的水平随石英刺激时间延长有增高趋势.DN-△p85与HELF相比,石英诱导的γH2AX水平,以及Ku70、Ku80蛋白水平增高受到抑制,差异有统计学意义(P＜0.05),而DNA-PKcs水平变化无统计学意义。两个细胞系的彗尾DNA百分含量均在石英刺激12h明显增高(P＜0.05),24h回落。DN-△p85在24h的彗尾DNA百分含量高于HELF(P＜0.05),DNA修复能力由75.74％下降为49.64％。
结论：石英可诱导DNA双链断裂损伤,PI3K与DNA损伤修复有关,通过调节Ku70/80水平,促进石英诱导的DNA双链断裂损伤的修复。
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