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目的 构建小鼠甲状旁腺素受体(PTHR)及其突变受体(DSEL)全长结构基因真核表达载体，建立稳定高表达PTHR及DSEL的HEK293细胞系，以应用于甲状旁腺素(PTH)模拟肽活性药物筛选及其信号通路的研究.方法 通过双酶切、胶回收方法分别纯化目的片段(PTHR、DSEL基因)和质粒pcDNA3.1(+)，二者分别由DNA限制性内切酶EcoR Ⅰ与Not Ⅰ双酶切，经T4 DNA Ligase连接的方法将PTHR、DSEL基因克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(+)中，采用测序方法及DNA限制性内切酶EcoR Ⅰ与Not Ⅰ双酶切方法鉴定重组质粒，脂质体转染法将重组体pcDNA3.1(+)-PTHR、pcDNA3.1(+)-DSEL及空质粒pcDNA3.1(+)分别转染至HEK293细胞，经G418筛选抗性细胞克隆，、RT-PCR及ELISA检测转染细胞PTHR、DSEL的表达情况.