我国不同地理种群黑腹果蝇中感染Wolbachia的多位点序列分型分析及CI检测

• 作 者: 熊恩娟 王玉凤 曾庆韬
• 机 构: 遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室,华中师范大学生命科学学院,武汉430079 湖北大学生命科学
• 出 处: 第七届湘、鄂、赣、粤、桂五省动物学学术研讨会
• 发表日期: 2012年11期
• 关键词: Wolbachia 多位点序列分型 黑腹果蝇 细胞质不亲和(CI)

　　Wolbachia是广泛存在于节肢动物体内的一类共生菌,能够以多种方式调控宿主的生殖方式,如引起宿主精卵细胞质不相容(CI)、孤雌生殖等.其中CI为最普遍的表型,即感染Wolbachia的雄性和未感染或感染不同品系Wolbachia的雌性宿主交配后,受精卵不能正常发育,在胚胎期死亡.而感染同种Wolbachia的雌性卵子能够挽救胚胎发育.多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)是一种通过测定多个持家基因序列来发现细菌变异的一种基因分型方法.本研究组前期工作表明,湖北武汉、云南六库、天津三个地区的黑腹果蝇都有Wolbachia感染,为了探究这三个地区果蝇感染的Wolbachia是否存在差异,我们将其进行了MLST型分析,首先通过克隆测序三个地区感染的Wolbachia的五个持家基因gatB,coxA,hcpA,ftsZ和fbpA的序列,查询其各自的编号和其序列号(sequence type),对其进行多位点序列分析,然后将不同地区的雄蝇和雌蝇进行正、反向交配,检测CI强度.结果表明,武汉感染的Wolbachia的ST序列号为1,云南六库和天津无已知序列号,新申请其序列号分别为259,258,其各自序列号不同,说明三地区果蝇感染的Wolbachia存在差异,但差异不大；武汉雄蝇与云南六库雌蝇,云南六库雄蝇与武汉雌蝇,wMel雄蝇与武汉雌蝇交配的胚胎孵化率分别为89.3％,85.6％,84.7％,孵化率较高,不会发生CI现象,说明互相之间的Wolbachia亲缘关系不远,与wMel Wolbachia关系较近,能够表现出挽救现象；武汉,云南,天津三地各自的CI强度分别为11.14％,46.31％,14.02％,此结果说明三地区不仅其ST序列不同,其各自的CI强度也不同,而且具有较大差异,表现为武汉地区果蝇CI强度较强,云南六库地区果蝇CI强度较弱.