【摘 要】
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为进一步研究日本血吸虫钙调神经磷酸酶B(CnB)功能,本研究应用PCR克隆了日本血吸虫CnB基因全长ORF共510bp,编码170个氨基酸,BLAST分析发现SjCnB与曼氏血吸虫CnB的相似性为97.
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海200241
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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为进一步研究日本血吸虫钙调神经磷酸酶B(CnB)功能,本研究应用PCR克隆了日本血吸虫CnB基因全长ORF共510bp,编码170个氨基酸,BLAST分析发现SjCnB与曼氏血吸虫CnB的相似性为97.6％,含4个EF-hand保守结构域.利用双酶切将SjCnB ORF重组插入pET28a(+)载体构建重组表达质粒pET28a(+)-CnB,并在BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白pET28a(+)-CnB分子量约20kDa,Western-blo-tting分析显示该重组蛋白具有较好的抗原性.利用His-bind纯化重组蛋白并免疫Balb小鼠制备抗体.实时定量PCR分析结果显示SjCnB基因在虫体各个时期均有转录,在42d成虫中转录水平较高.
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